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Los movimientos bruscos provocan la ruptura de las células rojas,
especialmente con animales lipémicos.
En estudios de rutina se debe incluir un procedimiento definido con pruebas
completas que lleven un tiempo razonable.
Se considera aceptable la siguiente secuencia:
1.- Preparación del frotis (Houwden 2000)
2.- Determinación del valor del hematocrito (NCCLS 2000; Bull y Hay 2001)
3.- Tinción del frotis (Houwden 2000)
4.- Determinar la concentración de hemoglobina
5.- Biometría: conteo de glóbulos rojos y blancos
6.- Determinación de proteínas plasmáticas con un refractómetro manual
(George 2001)
7.- Conteo diferencial de leucocitos (Tvedten y Korcal 1996)
C.- Suero y plasma
El suero es el líquido de color paja claro que se separa de la sangre coagulada;
se obtiene colectando sangre en un frasco o tubo de vidrio limpio y seco. Es
ventajoso colocar de costado el recipiente colector inmediatamente después
de la toma de la sangre, con el objeto de ofrecer una mayor superficie de
liberación de suero. Al presentarse la retracción del coágulo se libera el suero,
que se recupera por decantación; generalmente no se requiere la
centrifugación. El proceso puede acelerarse manteniendo el frasco o tubo con
la muestra en un baño María a 37 °C durante 1-2 horas.
En ocasiones se requiere clasificar el suero, para ello se puede centrifugar a
800 x g durante 15 min. Luego, el suero se decanta o se retira con una pipeta y
para su conservación requiere mantenerse en congelación hasta su uso.
El plasma es una porción que tiene las proteínas que existen en el suero, que
mantiene a los factores de la coagulación como el fibrinógeno y la protrombina.
El volumen de plasma generalmente excede el 50% de la sangre general.
Las muestras de plasma requieren una adecuada conservación, debido a que
las células continúan su metabolismo. Como ejemplo se puede citar a la
glucosa que es utilizada por las células y los electrolitos que se difunden en el
plasma al referirse las células. Por estas razones, la sangre entera requiere
combinarse con una sustancia anticoagulante que se selecciona de acuerdo
con el tipo de análisis propuesto. La muestra de sangre completa no se altera
en 24 horas si es refrigerada (Vahdat et al.1979).
D.- Anticoagulantes
Son sustancias que se emplean para suprimir o retardar la coagulación de la
sangre; puede actuar in vivo o in vitro,
o en ambos casos como ocurre con la
heparina. Los anticoagulantes pueden ser usados en forma cristalina o en
forma de líquidos son de uso común los oxalatos, el citrato de sodio, las sales
di potásicas o di sódicas de etilendiaminotetraacetico (EDTA), y la heparina
(Jones 1985a, 1985b: Mohri et al. 2007). Los tres primeros actúan ligando
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