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2. Fundamentos de microscopia óptica
Raquel Cossío Bayúgar
Estefan Miranda Miranda
2.1. Definición
Los microscopios son instrumentos ópticos de precisión diseñados para
producir imágenes amplificadas y libres de distorsiones de objetos demasiado
pequeños para ser vistos a simple vista. Un microscopio utilizado en
aplicaciones clínicas-científicas debe de cumplir con tres requisitos
fundamentales: 1) producir una imagen amplificada y sin distorsiones del
espécimen, 2). discernir claramente los detalles del espécimen y 3) hacer
estas imágenes y sus detalles registrables al ojo humano y/o a instrumentos de
registro de imágenes tales como cámaras fotografías y/o de video
(Abramowitz, 1987).
2.2. Escalas y medidas usadas en microscopía
Los objetos microscópicos, si bien tienen en común que solo se puedan ser
observados con la ayuda del microscopio, también tienen diversos tamaños, lo
cual creó la necesidad de desarrollar unidades de medidas micrométricas
(figura 1). El micrómetro (μm) es igual a la milésima parte de un milímetro (1 μm
= 0.001 mm) y ha sido adoptado como la unidad micrométrica fundamental
sobre la cual se comparan todos los objetos microscópicos. El nanómetro
(nm), es la milésima parte de 1 μm (1 nm =0.001 μm) y se utiliza para medir
objetos mucho menores a una célula eucarionte, como por ejemplo una
partícula viral. El Angstrom (Ä) es la diezmilésima parte de un μm (1 Ä = 0.0001
μm) y se utiliza para medir unidades todavía más pequeñas como las
macromoléculas por ejemplo las proteínas o los ácidos nucléicos.
En las escalas lineales con aplicaciones científicas se usa la escala decimal
exponencial de submúltiplos del metro (m), de esta manera un milímetro (mm)
-3 -6 -9
es 10 m, un micrómetro (μm) es 10 m, un nanómetro (nm) es 10 m y un
-10
Angstrom (Ä) equivale a 10 m. En la figura 1 se presenta una escala de
tamaños relativos de varios objetos microscópicos. Las células óseas miden
-5 -5
12 a 25 μm (1.2 a 2.5 X 10 m); los espermatozoides 45 a 50 μm (4.5 a 5 X 10
-6
m); los glóbulos rojos 7,5 a 8,5 μmde diámetro (7.5 a 8.5 X 10 m); una bacteria
-6 -8
2-3μm(2a3X10 m);unapartícula viral mide unos 10 nanómetros (10 m) las
-4
neuronas 100-200 μm ( 1a2X10 m);lasfibras musculares estriadas miden
-2
unos 5 cm (5 X 10 m).
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