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iones de calcio que normalmente se requieren en el mecanismo del coágulo; la
heparina previene la coagulación interfiriendo con la conversión de la
protrombina en trombina y con la acción de la trombina sobre el fibrinógeno.
Los oxalatos se han reemplazado por el EDTA en estudios de la morfología de
los elementos sanguíneos. Los oxalatos producen artefactos en los leucocitos
debido a esto los frotis deben realizarse a pocos minutos de que la sangre se
mezcle con el anticoagulante; los artefactos son cristales de oxalato
fagocitados por los neutrófilos y causa cambios en la morfología de los núcleos
en los linfocitos.
Una combinación de 0.8 g de oxalato de potasio y 1.2 g de oxalato de amonio
disuelto en 100 mL de agua destilada, es un anticoagulante balanceado. Esta
combinación es usada a razón de 0.1mL por cada mL de sangre.
El citrato de sodio se usa como anticoagulante a una parte en solución acuosa
al 3.8% en nueve partes de sangre; es decir al 10%. Esta solución es muy útil
en transfusiones. La heparina es un anticoagulante natural que se produce en
varios tejidos, pero se encuentra en forma abundante en el hígado. Esta
sustancia no altera excesivamente el volumen de los eritrocitos, sin embargo,
no es recomendable si se van a hacer los frotis porque las células se tornan
azulosas con la solución de Wright; también interfiere con las determinaciones
de fibrinógeno, y sólo retardan la coagulación más no la evita. Comúnmente se
usa en solución al 1% por lo que a una concentración de 0.1 mL previene la
coagulación de 5.0 ml de sangre.
El EDTA denominado también como secuestreno o verseno, es el preferido
para estudios morfológicos de la sangre; puede ser usado como sal di sódica o
potásica, esta última es la más soluble. Generalmente el EDTA se usa a una
concentración de 1.0-2.0 mg/ml de sangre. La refrigeración de la muestra con
EDTA es apropiada para determinar el volumen celular, hemoglobina, y conteo
de células hasta por más de 24 horas pos-colección. Comercialmente existen
tubos para sangrado que contienen ya este anticoagulante.
Este procedimiento consiste en extender sobre un portaobjetos una gota
pequeña de sangre en una sola capa, evitando la superposición de células. La
técnica comprende (Houwden 2000):
- Colocar una gota de sangre (2-3 l) en un portaobjetos limpio,
desengrasado y seco.
- Hacer contacto con otro portaobjetos con la gota de sangre.
- Inclinar en un ángulo de 30-45 grados, para que por capilaridad se
extienda en el borde que toca la gota.
- Deslizar de un sólo impulso al portaobjetos inclinado desde el sitio
dónde se coloca la muestra hasta el lado opuesto
- Secar la sangre para lo cual se ondea rápidamente el portaobjetos al
aire en una corriente de aire tibio.
- El secado deficiente ocasiona lisis de los eritrocitos.
- secado deficiente ocasiona lisis de los eritrocitos.
- Aplicar la coloración deseada.
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