Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

Ma contribution personnelle à ce travail :
Ma contribution à ce travail a été la transfection de la construction γ1 KI dans les cellules ES, le
criblage des clones positifs et le phénotypage complet des animaux.
L’aspect biotechnologique mis de côté, il est intéressant de regarder le phénotype de ces souris
sous l’aspect immunologique fondamental. Bien que la question de la capacité d’un BCR IgG à
se substituer à un BCR IgM lors du développement B ait déjà été posée par plusieurs équipes
décrivant des souris transgéniques ou knock-in… elle reste en suspens… Il y a quelques années,
les travaux de Tsubata et Goodnow avaient démontré une fonction hyper-activatrice du BCR IgG,
avec hyperplasmocytose accompagnée d’un fort taux d’IgG sérique, suggérant la notion d’un
BCR IgG « effecteur ». Il avait alors été démontré que ce BCR IgG transgénique n’était pas
sensible à la régulation négative de CD22 via la phosphatase SHP-1… mais ces données viennent
d’être contestées par Waisman et al., début 2007, n’identifiant ni hyper-différenciation
plasmocytaire, ni indépendance par rapport à CD22 dans des cellules B « knock-in pour l’IgG1
murine » qui cette fois sont, en plus, capables de construire un vrai répertoire B diversifié car les
autres modèles étaient des modèles transgéniques utilisant un VDJ déjà réarrangé. Il faut
cependant noter que le modèle de Waisman est biaisé car le gène γ1 utilisé est délété de son site
de polyadénylation « de type sécrété… »… on peut donc imaginer que cette délétion est assez
indigeste pour des cellules voulant se différencier en plasmocytes !!!. Les travaux d’Horikawa
(2007) vont cependant dans le même sens que ceux de Waisman alors que la mutation qu’ils
étudient, ne s’accompagne pas d’une délétion du site polyA de type sécrété. Dans leur modèle, il
s’agit d’un simple remplacement de la partie trans-membranaire et intracellulaire de l’IgM par
celle d’une IgG1 dans un modèle de transgène anti-lysozyme. On peut cependant noter que ce
modèle présente un autre biais : celui de présumer que la spécificité de signal d’une IgG par
rapport à une IgM se résume au rôle de sa queue intra-cellulaire (dans notre modèle, nous avons
l’avantage de travailler avec une chaîne γ1 complète !). Même s’il n’est pas inducteur de
plasmocytose et s’il est soumis à l’inhibition par CD22, le BCR IgG1 pour Waisman et Horikawa
apparaît plus activateur qu’une IgM (en matière de flux calciques) et pouvant lui être substitué
précocément pendant la différenciation des progéniteurs B dans la moelle osseuse mais avec un
ralentissement de la transition proB vers pré-B.
Le modèle KI IgG1 humaine que nous avons décrit dans cette thèse, avec une application
potentiellement plutôt biotechnologique, est encore partiellement étudié et nécessite des
explorations poussées pour qu’on puisse l’opposer aux précédents et comprendre de quels
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