Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

Article 3
“Modulation of glycotranscriptome and of glycosaminoglycan biogenesis genes
along B cell lineage differentiation”
Sophie Raynal-Duchez, Virginie Pascal, Nadine Cogné, Chantal Jayat-Vignoles, Virginie
Lespinet, Raymond Julien and Michel Cogné.
(Manuscrit en préparation)
Dans une autre perspective d’étude des phénomènes pouvant modifier la réactivité des récepteurs
de surface de la cellule B, nous nous sommes intéressés à la modulation de la glycosylation au
cours de la différenciation B par l’étude des variations de l’expression de gènes impliqués dans la
glycosylation, afin d’être capables par la suite, de différencier des sous-populations B
correspondant à différents états de maturation, d’activation ou de localisation.
Cette étude du glycotranscriptome, nous a notamment permis de cibler puis d’étudier d’une
manière plus approfondie deux gènes d’intérêt CsGalNacT1 et Extl1 jouant tous deux un rôle
dans la biosynthèse des glycosaminoglycannes. Ces deux gènes sont exprimés de façon plus ou
moins souvent inverse dans la maturation B. CsGalNacT1 étant absent aux stades B au repos
mais exprimé aux stades immatures et B activés alors qu’Extl1 n’est quand à lui pas exprimé aux
stades B immatures, alors qu’il est exprimé au stade mature au repos avec une expression qui
diminue aux stades B activés.
Dans le but de discerner si cette régulation d’expression présente un rôle fonctionnel ou pas, nous
avons choisi de la compromettre et de guetter ce que seraient, s’il y en a, les effets de cette
dérégulation. Alors que peu de données sont disponibles quant au rôle de ces enzymes in vivo,
nous avons donc réalisé des lignées de souris transgéniques surexprimant de façon B-spécifique
ces 2 gènes. Lors de l’amplification des ADNc respectifs de CsGalNAcT1 et Extl1 dans le but de
construire les vecteurs de transgenèse, nous avons amplifié une forme courte du transcrit
CsGalNAcT1 issue d’un épissage alternatif que nous appelons CsGalNAcT1∆. Ce transcrit,
encore inconnu, apparaît spécifique à la lignée lymphoïde (il est seulement détecté dans la moëlle
osseuse, la rate, les ganglions et le thymus) et code une protéine tronquée ayant perdu son site
catalytique et pouvant donc jouer le rôle de dominant négatif.
Ces différentes souris transgéniques CsGalNAcT1FL, Extl1 et CsGalNAcT1∆ ont récemment été
réalisées. Deux lignées de souris transgéniques issues de deux clones ES différents pour Extl1 et
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