Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

L’action des cytokines semble s’exercer essentiellement au niveau des promoteurs
germinaux. Des sites de fixation de certains facteurs de transcription dans les promoteurs
germinaux ont été identifiés et agissent en réponse à l’action des cytokines. Les cytokines
induiraient l’expression ou l’activité de facteurs transcriptionnels souvent multiples et capables
de former des complexes activateurs en se liant à leurs promoteurs germinaux cibles (Delphin
and Stavnezer, 1995; Warren and Berton, 1995). Par exemple, la stimulation in vitro des cellules
B par le l’IL-4 en présence de LPS induit la transcription germinale de γ1 et ε par le recrutement
de Stat6, NF-κB, PU.1, BSAP(Pax5), C/EBP et AP-1 (Geha et al., 2003).
Le fait que tous les transcrits germinaux aient la même structure suggère qu’ils exercent,
par eux-mêmes, une fonction importante. Des mutations ciblées qui abolissent ou altèrent la
structure de ces transcrits indiquent que non seulement leur existence mais encore leur épissage
correct sont nécessaires au mécanisme de commutation isotypique. La transcription en elle-même
n’est pas suffisante pour obtenir la commutation de classe, puisque le remplacement de l’exon Iε
par un promoteur fort mais non inductible par l’IL4 (Eµ associé au promoteur pVH) conduit à
une transcription germinale forte, mais diminue cependant la commutation de classe (Bottaro et
al., 1994). La corrélation entre la synthèse des transcrits germinaux et la commutation isotypique
a conduit à proposer un modèle basé sur l’accessibilité de la chromatine. Grâce à leur remodelage
chromatinien et à la transcription germinale qui lui est associée, les régions S deviendraient
accessibles à des facteurs agissant en trans (Stavnezer-Nordgren and Sirlin, 1986). Au regard de
cette hypothèse, il a été montré que les gènes constants, en cours de commutation, étaient
hypométhylés, hyperacétylés et présentaient des sites d’hypersensibilité à la DNase I dans le
promoteur germinal (Berton and Vitetta, 1990).Cependant, l’hyperacétylation des histones des
régions S et des promoteurs germinaux ne suffit pas à induire la commutation isotypique sans
transcription germinale (Nambu et al., 2003).
La transcription germinale pourrait également aboutir à la formation de structures
particulières, au niveau de l’ADN, qui seraient la cible de AID pour initier le clivage de l’ADN et
déclencher la commutation de classe (Chaudhuri and Alt, 2004). Quatre modèles de structures ont
été proposés : les quartets G (Dempsey et al., 1999), les stem-loops (Tashiro et al., 2001), la
boucle R (Yu et al., 2003) et la bulle stabilisée par RPA (protéine se liant à l’ADN simple brin et
impliquée dans la réplication et la réparation) (Chaudhuri et al., 2004). Figure 19. De ces quatre
structures, seul le modèle de la boucle R simple brin a été démontré in vivo. Ces boucles
contiennent un hybride stable ARN-ADN sur le brin riche en G et une région simple brin au
niveau de la séquence riche en C.
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