Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

Article 5
“Light chain inclusion permits terminal B cell differentiation and does not
necessarily result in autoreactivity”
Christophe Sirac, Claire Carrion*, Sophie Raynal-Duchez*, Isabelle Comte and Michel Cogné.
(* contribution égale)
www.pnas.org/cgi/doi/10.1073/pnas.0509121103
(Manuscrit accepté le 23 Mars 2006 à Proceedings of the National Academy of Sciences, USA)
Lors du développement des cellules B, l’assemblage du BCR se fait normalement selon un
processus ordonné de réarrangement (détaillé dans le chapitre II) aboutissant à ce que chaque
cellule B ne possède qu’un seul type de récepteur à sa surface grâce au phénomène d’exclusion
allélique, essentiel dans la génération du répertoire B. Cependant, plusieurs travaux ont démontré
l’existence d’un faible taux de cellules B périphériques exprimant deux chaînes lourdes distinctes
(Barreto et Cumano, 2000) ou, plus fréquemment, deux chaînes légères, une κ et une λ (Giachino
et coll., 1995). Dans ce travail, nous avons étudié les effets de l’insertion génique d’un gène VκJκ
humain réarrangé en lieu et place des domaines Jκ du locus endogène de la souris. Cette étude a
démontré l’apparition de cellules « inclues » dans les animaux hétérozygotes et homozygotes
pour le transgène, c’est-à-dire exprimant une chaîne légère λ endogène et la chaîne chimérique κ.
Ces cellules participent normalement aux réponses immunitaires et peuvent se différencier en
cellules B mémoires commutées ou en plasmocytes sécréteurs d’anticorps hybrides κ et λ non-
autoréactifs. Cela indique que l’exclusion allélique des chaînes légères n’est pas un pré-requis au
développement de cellules B normales et que la sélection négative des BCR auto-réactifs peut
s’effectuer même sous des conditions d’inclusion.
Contribution personnelle à ce travail :
J’ai essentiellement participé à cette étude lors des révisions demandées pour l’acceptation de ce
papier alors que Christophe avait quitté le laboratoire pour son stage post-doctoral. Mon travail a
en particulier consisté en la mise au point de RT-PCR Quantitative–sybrGreen sur des
échantillons d’ARN de cellules B matures que j’ai préalablement triées afin de quantifier
l’expression des transcrits κ et µ dans les souris hétérozygotes et homozygotes pour la mutation.
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