Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

maturation : aux stades précoces, Eµ et hs4 semblent prépondérants ; hs3a, hs1,2 et hs3b sont
actifs aux stades tardifs, mais leurs effets continuent d’être accentués par Eµ et hs4 jusqu’au stade
plasmocytaire, au cours duquel l’efficacité des séquences régulatrices semble être optimale
(Chauveau et al., 1998). Par ailleurs, il a été suggéré que la combinaison de ces quatre éléments
leur conférait les propriétés d’une LCR (Locus Control Region) (Chauveau et al., 1999; Madisen
and Groudine, 1994). Une LCR est définie comme une séquence d’ADN capable, dans un
système transgénique ou de transfection stable, de conférer au gène associé une expression tissu-
spécifique avec un taux transcriptionnel élevé dépendant du nombre de copies et indépendant du
site d’intégration (Ernst and Smale, 1995). Le rôle in vivo de la LCR en 3’ du locus IgH n’est pas
encore totalement élucidé. En effet, la redondance des séquences activatrices complique
considérablement l’évaluation de leur implication individuelle dans les processus touchant le
locus IgH (réarrangements, transcription, etc...). Ainsi, le remplacement, par recombinaison
homologue, de hs1,2 par le gène de résistance à la néomycine induit une forte diminution de la
commutation de classe (Cogne et al., 1994; Manis et al., 1998). L’inactivation individuelle de
hs3a et hs1,2 par le système Cre-loxP n’a pas révélé de phénotype remarquable (Manis et al.,
1998). Ce n’est que récemment que l’action redondante de ces différents activateurs à été mise en
évidence dans une expérience de délétion où deux de ces éléments étaient éliminés du locus. Ces
travaux ont clairement démontré le rôle essentiel des deux éléments les plus distaux dans la
transcription germinale des gènes constant de chaînes lourdes et dans la commutation isotypique
(Pinaud et al., 2001).
En 3’ du locus κ existe en outre un activateur « 3’κ », qui fonctionne en synergie avec
l’activateur intronique afin de permettre l’expression et les réarrangements normaux au niveau du
locus Igκ (Inlay et al., 2002). Plus loin encore en 3’, un enhancer « downstream » (« Ed ») a été
récemment identifié chez la souris et chez l’homme, avec une activité spécifique du stade
plasmocytaire (Liu et al., 2002). Il existe également en 3’ du locus λ, un enhancer intronique
« 3’λ » qui va permettre l’expression et les réarrangements au niveau du locus lambda de même
que l’hypermutation somatique (Popov et al., 1999).
d. Les éléments atténuateurs « silencers » et les « MAR »
Ils ont notamment été caractérisés dans les régions intervenantes entre segments V et J, ainsi que
dans les régions d’ancrage à la matrice nucléaire (régions MAR). Comme les promoteurs et les
enhancers, ils possèdent des sites de liaison à des facteurs de régulation trans (Liu et al., 2002).
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