Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

Article 4
“RNA surveillance down-regulates expression of nonfunctional κ alleles and
detects premature termination within the last κ exon”
Laurent Delpy, Christophe Sirac, Emmanuelle magnoux, Sophie Raynal-Duchez and Michel
Cogné.
www.pnas.org/cgi/doi/10.1073/pnas.0305586101
(Manuscrit accepté le 22 Mars 2004 à Proceedings of the National Academy of Sciences, USA)
La recombinaison V(D)J peut induire l’addition ou la délétion de nucléotides de façon aléatoire.
Dans certains cas, ces réarrangements génèrent un décalage du cadre de lecture pouvant induire la
présence de codons stop prématurés (PTC pour Premature Termination Codon) et par
conséquence, la possibilité de produire une chaîne d’immunoglobuline tronquée. Bien qu’une
forte proportion de lymphocytes matures périphériques possède un allèle non fonctionnel aux loci
IgH et/ou IgL, l’expression de chaînes tronquées n’est pas observée dans les cellules B normales.
Laurent Delpy et Christophe Sirac ont voulu montré que les transcrits de chaînes légères κ
possédant des décalages du cadre de lecture provoqués par les recombinaisons V-J (et induisant
ainsi des mutations non-sens) étaient sujets à un processus de surveillance des ARN pouvant
engendrer leur élimination ou l’inhibition de leur épissage et ainsi, permettre le maintien de
l’exclusion allélique des chaînes légères dans des cellules possédant deux allèles réarrangés dont
l’un « hors-phase ».
Contribution personnelle à ce travail :
Ce travail, initié lors de mon stage de maîtrise et achevé au début de ma première année de thèse
a consisté en l’amplification par PCR des jonctions Vκ-Jκ, leur clonage dans des vecteurs PCRII-
TOPO puis le séquençage et l’analyse de ces différents produits de PCR.
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