Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

CsGalNAcT1FL ont été obtenues alors qu’on ne compte, à ce jour, qu’une seule lignée pour
CsGalNAcT1∆. L’analyse très récente de ces animaux (CsGalNAcT1FL et Extl1) sur une seule
lignée montre certaines différences mais ces différentes pistes restent préliminaires et ne
permettent encore pas de conclure quant à l’importance de ce phénotype, sa reproducibilité, et
donc de déterminer les rôles de ces enzymes dans la lignée B.
Cet article, « en gros travaux » mérite beaucoup plus de manipulations à la paillasse afin de
mettre en évidence les rôles précis et incontestables de ces enzymes in vivo au cours de la
maturation B et donc comprendre de façon plus large, le rôle des GAGs le long de la
différenciation B, du stade B immature au stade très mature, plasmocyte-sécréteur d’anticorps.
Contribution personnelle au travail :
Ma contribution à ce travail a été :
1) de réaliser les purifications de cellules, les préparations d’ARN et de cDNA, de créer deux
« micro-fluidic cards » d’intérêt en choissant des gènes impliqués dans la glycosylation, mais
également l’analyse, le traitement et l’interprétation des données de PCR quantitative
2) d’effectuer les clonages et les constructions B-spécifiques permettant la surexpression des
gènes Extl1 et CsGalNAcT1 (FL et ∆)
3) de transfecter ces constructions dans les cellules ES et de cribler les clones positifs
4) de phénotyper les animaux.
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