Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

membranaire s’avère possible expérimentalement pour les IgG en absence de l’hétérodimère
(Abney et al., 1978; Knight et al., 1997; Venkitaraman et al., 1991; Weiser et al., 1994).
Au cours de ce travail de thèse, nous avons voulu savoir si un BCR commuté à IgA où à
IgE pouvait permettre un développement B normal chez la souris, ainsi qu’une réponse
spécifique à l’antigène. Avant d’aborder la partie plus expérimentale de mon travail, je vais vous
détailler dans ce chapitre, les différents modèles de souris transgéniques (KO, KI et transgenèse)
déjà établis dans le but de susbstituer à l’expression d’un BCR normal IgM/IgD celle d’un BCR
muté, commuté ou pas.
Roth et al., en 1993, ont montré qu’une chaîne lourde transgénique γ2b bloquait
partiellement le réarrangement et l’expression de la chaîne µ endogène mais ne pouvait ensuite se
substituer à cette chaîne µ. Les souris porteuses du transgène γ2b présentent donc un déficit en
cellules B. Les jeunes souris n’ont pratiquement pas de cellules B. A 4 semaines, les souris ont
environ 10% de B dans la rate et n’arrivent à accumuler un nombre normal de cellules B qu’à
partir de 16 semaines. Toutes les cellules B qui se développent dans ces conditions expriment la
chaine µ endogène (comme c’est le cas dans les souris transgéniques human γ1 qui n’ont pas de
cellules B exprimant uniquement le transgène γ1 (Yamamura et al., 1986)). γ2b ne peut donc pas
promouvoir la maturation B et ceci ne serait pas dû à un effet toxique du transgène puisqu'un
croisement avec des souris transgéniques µ restaurerait la maturation B et un croisement avec les
souris µ-membrane KO, ne restaurerait pas le compartiment B. L'expression d'IgG2b est
retrouvée dès les stades précoces du développement et induirait un fort « feed-back » négatif sur
l'expression des gènes des chaînes lourdes endogènes (Denis et al., 1990; Roth et al., 1993; Shen
et al., 1999). Une fois ce stade dépassé, le rôle anti-apoptotique d'IgM ainsi que le signal de
différenciation cellulaire ne pourraient donc être assurés par cette chaîne γ2b transgénique. Ces
différents résultats ont été montrés dans plusieurs lignées transgéniques fondatrices différentes,
porteuses du même transgène. Une seule lignée transgénique (« C line »), exprimant le même
transgène γ2b, permettrait un développement normal après croisement avec les souris µ-
membrane KO). Le site d'intégration et/ou le niveau d’expression du transgène semblent donc
moduler ce phénotype. On ne peut pas exclure non plus dans ces expériences de transgenèse, un
rôle de la région variable, la restriction du répertoire à un VHDJH particulier pouvant peut-être
avoir des effets imprévisibles sur la maturation B. Mais si la maturation B dans ces souris (« C
line ») ne nécessite pas l'expression d'IgM, elle semble dépendante de l'expression de la chaîne λ5
en association avec un facteur inconnu (Kurtz et al., 1997; Roth et al., 1995).
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