Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

conduire les cellules B au long de leur développement jusqu’au stade final plasmocyte-sécréteur
d’anticorps. Pour cela, nous avons réalisé plusieurs modèles de knock-in portant des BCR
modifiés où le gène Cα1 humain dans un cas et Cε humain dans un autre, ont été intégrés par
recombinaison homologue au niveau de la région switch µ afin d’obtenir une lignée de souris
transgéniques n’exprimant que des IgA ou des IgE. Nous avons choisi des gènes constants
humains pour palier au problème de switch résiduel endogène.
Dans une autre perspective d’étude des phénomènes pouvant modifier la réactivité des
récepteurs de surface de la cellule B, nous nous sommes intéressés à la modulation de la
glycosylation au cours de la différenciation B. La glycosylation est un des principaux événements
de maturation post-traductionnelle des protéines et des lipides. Elle consiste en une succession de
réactions enzymatiques aboutissant à l’élaboration de motifs glycanniques greffés sur des
glycoprotéines ou des glycolipides. La diversité des combinaisons glycanniques permet de
multiples interactions. Sachant que chaque modification (le greffage ou le clivage d’un sucre)
dépend de l’activité d’un gène, il nous a semblé intéressant d’étudier les variations de
l’expression de gènes impliqués dans la glycosylation afin d’être capables, par la suite, de
différencier des sous-populations B correspondant à différents états de maturation, d’activation
ou de localisation. Cette étude du glycotranscriptome au cours de la maturation B, nous a permis
de cibler puis d’étudier d’une manière plus approfondie 2 gènes d’intérêt CsGalNacT1 et Extl1
jouant un rôle dans la biosynthèse des glycosaminoglycannes. Nous avons donc réalisé des
lignées de souris transgéniques surexprimant de façon B-spécifique ces gènes afin de comprendre
plus précisément le rôle de ces enzymes in vivo au cours du développement B.
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