Modèles transgéniques pour l'étude de la fonction ... - Epublications

l’hypermutation (Muramatsu et al., 1999). Ce modèle est encore aujourd’hui soutenu par l’équipe
d’Honjo. Cependant, un autre courant et des données solides suggèrent plutôt qu’AID agit
directement sur l’ADN (Bransteitter et al., 2003; Chaudhuri et al., 2003; Dickerson et al., 2003;
Petersen-Mahrt et al., 2002; Pham et al., 2003).
AID est essentiellement localisée dans le cytoplasme des cellules B, probablement pour
limiter son effet mutagène. Après activation des cellules B, elle est transloquée dans le noyau
grâce à un signal de localisation nucléaire présent dans se partie N-terminale puis est exportée du
noyau grâce à une séquence-signal d’export localisée dans sa partie C-terminale (Ito et al., 2004;
McBride et al., 2004). Le mécanisme qui régule le ratio nucléaire/cytoplasmique est inconnu
mais certaines données suggèrent une corrélation avec la phosphorylation de AID par la protéine
kinase A (PKA) dépendante de l’AMPc (Basu et al., 2005). L’analyse mutationnelle de AID a
révélé que la protéine avait une structure bipartite au regard de son activité mutagénique. Les
mutations affectant sa partie N-terminale bloquent la SHM mais pas la CSR alors que les
mutations affectant sa partie C-terminale bloquent la CSR mais pas la SHM suggérant fortement
l’existence de cofacteurs distincts pour la SHM et la CSR, mais leur identité reste pour l’instant
inconnue (Shinkura et al., 2004).
AID semble intervenir dans l’initiation de la commutation de classe en générant une
déamination des cytosines (dC) en uraciles (dU) au niveau des régions S riches en motifs AGCT
considérés comme des « hots spots » de déamination, comparables à ceux de l’hypermutation
somatique (Chaudhuri and Alt, 2004; Zarrin et al., 2004). La génération d’ADN simple brin au
cours de la transcription germinale des régions S semble être impliquée dans le ciblage de
l’action d’ AID vers les régions riches en GC (Figure 20). A la suite de la déamination des
cytosines par AID, l’action de l’uracile glycosilase (UNG) (et peut-être du complexe Msh2-
Msh6) est d’éliminer la mutation entraînant ainsi la formation d’un site abasique (gap) :
processus pré-requis dans le modèle de réparation des « mismatch » par la voie de réparation
BER (« Base Excision Repair »). Il est à noter que les souris déficientes en UNG montrent un
blocage sévère dans la commutation de classe (Rada et al., 2002; Schrader et al., 2005). APE1,
endonucléase apurinic/apyrimidique ayant un rôle majeur dans cette voie, génère une coupure au
niveau de ce site. Cependant, des données récentes impliquent plutôt le complexe MRN
(Mre11/Rad50/Nbs1) dans ce clivage (Larson et al., 2005). Les coupures sont ensuite réassociées
par un processus nécessitant l’intervention de nombreux facteurs protéiques tels que H2AX
(histone 2A family member X), 53BP1 (p53 binding protein), mutL homologue 1 (MLH1),
l’ataxia telangiesctasia mutated (ATM) et DNA-PKcs (Petersen et al., 2001; Reina-San-Martin et
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