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15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)
Nome del test Quantità/Materiale Metodo
Osservazioni
Adenovirus equino 1
(DNA)
Anaplasma spp.
(DNA, rilevazione di
più specie)
Arterite Virale Equina
(EVA, Equine Viral Arteritis)
(RNA)
tampone corneale, congiuntivale PCR (1)
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
2 ml EB, milza, midollo real time-PCR (1)
In animali con sintomi clinici un esito positivo è a favore di
un'infezione con uno o più dei seguenti agenti eziologici:
A. phagocytophylum, A. platys.
È possibile richiedere una differenziazione tra
A. phagocytophylum e A. platys ricorrerendo ad un'analisi
sequenziale del prodotto PCR amplificato.
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
Materiale a seconda della sintomatologia real time-PCR (1)
(vedi sotto)
Esistono diversi tipi di materiale indicati per un'analisi di genetica
molecolare dell'EVA:
- sperma, liquido seminale (1 ml)
- tampone vaginale, lavaggio vaginale (2-5 ml)
- secreto nasale, lavaggio tracheale (2-5 ml)
- S, EP, CP (1 ml)
- EB, NaF (3 ml)
- tessuto: linfonodale, splenico, (almeno 0,5 g)
polmonare, placentale, fetale
- (urina) (5 ml)
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
Attenzione In Italia l'arterite virale equina è una malattia soggetta a
obbligo di denuncia.
Nome del test Quantità/Materiale Metodo
Osservazioni
Babesia felis (DNA)
(gatto)
Babesia spp. (DNA)
(cane)
Babesia spp. (DNA)
(cavallo)
0,5 ml EB real time-PCR (1)
La microscopia rappresenta ancora l'esame diagnostico
standard per rilevare una babesiosi. La PCR mostra tuttavia
notevoli vantaggi in termini di sensibilità.
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
0,5 ml EB real time-PCR (1)
Il test permette di rilevare Babesie sia grandi che piccole;
l'esame comprende un'analisi sequenziale, in grado di
differenziare tra: B. canis canis, B. canis vogeli, B. canis rossi, B.
gibsonii e B. conradae.
Rispetto all'identificazione con il microscopio ottico su striscio
di sangue la PCR è nettamente più sensibile.La parassitemia
inizia 5-10 giorni dopo l'infezione. In caso di infezione cronica
le fasi parassitemiche si alternano a momenti di quiescenza e
scomparsa dal circolo periferico del parassita, rendendo
spesso difficile il rilievo diretto del parassita.
Una rilevazione diretta del parassita non è quindi sempre
possibile!
0,5 ml EB PCR (1)
Dal punto di vista sierologico un'infezione con Babesia spp. è
rilevabile a partire da almeno 10-14 gg. p.i. In rari casi la sieroconversione
può mancare del tutto. Nella fase iniziale dell'infezione
è possibile rilevare l'agente patogeno al
microscopio su striscio di sangue. Tuttavia, dal momento che
spesso è solo una piccola percentuale degli eritrociti ad essere
colpita, si possono avere dei risultati erroneamente negativi. La
PCR è un metodo alternativo sensibile per ottenere chiarezza
diagnostica in merito a un'infezione con Babesia anche prima
della formazione di anticorpi specifici. È anche possibile,
qualora sussista un particolare interesse, una differenziazione
delle singole specie per mezzo di analisi sequenziale della
PCR amplificato.
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
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