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15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Herpesvirus equino 2<br />
EHV-2 (DNA)<br />
Herpesvirus equino 5<br />
EHV-5 (DNA)<br />
Herpesvirus felino 1<br />
FHV 1 (DNA)<br />
Herpesvirus rettili - RHV<br />
(DNA)<br />
Influenza virale equina<br />
(RNA)<br />
Sintomi oculari: PCR (1)<br />
tampone corneale o congiuntivale<br />
Sintomi delle vie respiratorie:<br />
tampone nasale, secreto nasale o tracheale<br />
Anche in questo caso la PCR ha il vantaggio di identificare un<br />
nesso eziologico fra agente patogeno ed organo bersaglio.<br />
Tampone cfr. → EHV 2 PCR (1)<br />
La rilevazione specifica di EHV-5 con metodo PCR è possibile,<br />
la sua rilevanza clinica tuttavia non è ancora chiarita.<br />
Cheratocongiuntivite: real time-PCR (1)<br />
tampone dalla regione lesa della cornea/congiuntiva<br />
Rinotracheite: tampone nasale o faringeo<br />
Infezioni genitali: tampone vaginale<br />
Aborto: materiale abortivo<br />
Mentre gli animali con malattia acuta rilasciano grandi quantità<br />
di virus, l'escrezione dell'agente patogeno dagli animali con<br />
infezione cronica è modesta e intermittente. Grazie alla sua<br />
elevata sensibilità, la PCR offre un buon metodo di analisi per<br />
l'identificazione di questi escretori cronici del virus. Tuttavia,<br />
data la discontinuità dell'escrezione, in caso di risultato<br />
negativo è necessario ripetere il test.<br />
Tampone buccale in soluzione fisiologica PCR (3)<br />
La PCR permette la ricerca diretta dell'agente patogeno.<br />
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Tampone nasale, lavaggio tracheale real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Leishmania spp.<br />
(DNA, rilevazione di più<br />
specie)<br />
Leptospira spp.<br />
(DNA, rilevazione di più<br />
specie)<br />
Particolarmente efficace è la PCR su puntato linfonodale e di<br />
midollo osseo. Uno dei vantaggi più notevoli della rilevazione<br />
dell'agente patogeno con metodo PCR consiste nella possibilità<br />
di identificare animali portatori sani, nei quali i titoli anticorpali<br />
spesso restano al di sotto della soglia di rilevabilità.La rilevazione<br />
dell'agente patogeno con metodo PCR su midollo osseo può<br />
anche essere impiegata a fini di controllo terapeutico.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
La rilevazione dell'agente patogeno con metodo PCR viene<br />
effettuata su sangue nelle prime 2 settimane (eventualmente<br />
fino a due mesi) dopo l'infezione, ma a partire dalla seconda<br />
settimana p.i. si deve tuttavia privilegiare l'urina come materiale<br />
di analisi. Le Leptospire restano infatti rilevabili nell'urina per<br />
mesi, se non per anni, sebbene vengano rilasciate con ritmo<br />
intermittente. Rispetto ai metodi sierologici la PCR ha così il<br />
vantaggio di poter confermare un sospetto clinico già nelle<br />
primissime fasi dell'infezione, prima ancora della comparsa di<br />
anticorpi specifici (ca. 10 giorni p.i.). Permette inoltre di<br />
identificare escretori cronici, anche se vaccinati. Tuttavia, a<br />
causa del rilascio intermittente, in caso di risultato negativo è<br />
necessario ripetere il test.<br />
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Attenzione La leptospirosi è una zoonosi.In Italia la leptospirosi è una malattia<br />
soggetta a obbligo di denuncia.<br />
Leucemia felina<br />
Lesioni cutanee: biopsia cutanea real time-PCR (1)<br />
Linfoadenopatia: puntato linfonodale<br />
Rinite: tampone nasale<br />
Inoltre: biopsia osteo-midollare, epatica, splenica<br />
2 ml EB, 5 ml U, liquor, umore acqueo real time-PCR (1)<br />
vedi → FeLV<br />
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