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15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)
Nome del test Quantità/Materiale Metodo
Osservazioni
Circovirus suino 2
(PVC-2) (DNA)
Coronavirus canino
CECoV (RNA)
Coronavirus felino/FIP,
FECV
Linfonodi, polmone, fegato, milza, PCR (3)
eventualmente tampone nasale
Il Circovirus suino di tipo 2 (PVC-2) è stato descritto da non
molto tempo (Canada 1998) a differenza del PCV-1, che è invece
un Circovirus già noto da tempo e non patogeno. Il PVC-2
provoca i sintomi più svariati nei maiali da ingrasso o in fase
di svezzamento (p.es. rallentamento della crescita, dispnea,
ingrossamento dei linfonodi, pallore, ittero, diarrea), il cui
complesso è anche conosciuto come "sindrome deperimento
multisistemico post svezzamento" (PMWS, Postweaning
Multisystemic Wasting Syndrome). Un quadro clinico manifesto
è stato finora riscontrato solo in combinazione con infezioni
secondarie (PRRS, Porcine Reproductive and Respiratory
Syndrome, sindrome respiratoria e riproduttiva del suino e PPV,
Porcine Parvovirus, Parvovirus suino). Un'altra sindrome a cui
viene collegato il Circovirus suino 2 è la "sindrome dermatite e
nefropatia del suino" (PDNS, Porcine Dermatitis Nephropathy
Syndrome). Si tratta probabilmente di una patologia da immunocomplessi,
sulla quale peraltro ancora non si conosce molto.
Anche sull'escrezione del virus si dispone di poche informazioni:
è stato rilevato finora sperimentalmente nel secreto oculare, nella
saliva e nelle feci. La trasmissione transplacentare, anche se
possibile, non svolge probabilmente un ruolo importante. Il virus
mostra un'affinità per il tessuto linfatico e porta ad un'immunodepressione,
che è causa a sua volta di infezioni secondarie.
Problemi di gestione dell'allevamento possono favorire l'insorgere
della sindrome. La mortalità può superare l'80%. Si possono
avere infezioni latenti.
tampone rettale, feci real time-PCR (1)
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
vedi → FIP/Coronavirus felino, FECV
Nome del test Quantità/Materiale Metodo
Osservazioni
Coronavirus TGEV
(Gastroenterite trasmissibile
del suino) (RNA)
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
Attenzione In Italia la gastroenterite trasmissibile (TGE, Transmissible
Gastro Enteritis) è una malattia soggetta a obbligo di denuncia.
Dirofilaria
Ehrlichia spp. (DNA,
rilevazione di più specie)
(cane, gatto)
feci, tampone rettale, mucosa intestinale real time-PCR (1)
vedi → Filaria spp.
2 ml EB, 0,5 ml liquor real time-PCR (1)
In animali con sintomi clinici un esito positivo è a favore di
un'infezione con uno o più dei seguenti agenti eziologici: E.
canis, E. ewingii, E. chaffeensis.
È possibile richiedere una differenziazione delle singole specie
ricorrerendo ad un'analisi sequenziale del prodotto PCR
amplificato.
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
Ehrlichia canis (DNA) 2 ml EB, biopsia splenica, midollo osseo real time-PCR (1)
Con metodo PCR è possibile rilevare E. canis nel sangue già a
partire dal 4° giorno p.i., vale a dire ben prima della comparsa
dei primi anticorpi. Con questo metodo è anche possibile
controllare la riduzione dell'agente patogeno sotto la soglia di
rilevabilità in seguito a terapia antibiotica, mentre a causa della
lunga persistenza degli anticorpi la sierologia è meno adatta ad
un controllo terapeutico. Un risultato positivo alla PCR conferma
il sospetto di un'infezione da E. canis, un risultato negativo
invece non è sufficiente a escludere un'ehrlichiosi, essendo
possibile che al momento del prelievo le Ehrlichie non si
trovassero nel sangue, o che non lo fossero in misura
sufficiente, o che fosse in corso un'infezione con altre
specie di Ehrlichia.
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