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15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)
Nome del test Quantità/Materiale Metodo
Osservazioni
Polyomavirus aviario
(Virus della BFD)
(DNA)
RHV
Diarrea: tampone cloacale, feci PCR (1)
Alterazioni del piumaggio: penne alterate
Post mortem:
reni, milza, fegato
Forma cronica: 0,5 ml EB, penne
Una delle modalità più importanti di propagazione della malattia
delle cocorite allo svezzamento (BFD, Budgerigar Fledgling
Disease), malattia virale dovuta a un Polyomavirus, è, oltre al
contagio verticale, anche la diffusione del virus per mezzo di
animali con malattia asintomatica. Questi ultimi possono venire
identificati rilevando il virus per mezzo di PCR su tamponi
cloacali. Per identificare anche gli escretori intermittenti
occorre tuttavia analizzare diversi campioni a distanza di tre
mesi l'uno dall'altro. Se si osservano alterazioni del piumaggio,
è possibile confermare la diagnosi clinica sospetta anche per
mezzo di analisi PCR sulle penne alterate. Con uccelli giovani
morti in seguito a forma iperacuta è possibile anche la
rilevazione del virus da fegato, reni o milza.
Rhodococcus equi (DNA) tampone/ lavaggio real time-PCR (1)
tracheale, feci, tessuti
La PCR, come ricerca diretta dell'agente patogeno, permette di
- confermare il sospetto diagnostico
- accorciare i tempi per la conferma del sospetto
diagnostico-assicurare che la popolazione equina sia esente
da R. equi
- prevenire la diffusione dell'agente patogeno
- minimizzare l'esposizione dell'uomo a questo batterio
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
vedi → Herpesvirus rettili
Nome del test Quantità/Materiale Metodo
Osservazioni
Toxoplasma gondii
(DNA)
A causa dell'alta sieroprevalenza sia nel cane che nel gatto, la
rilevazione di anticorpi nel siero è di relativa utilità per la diagnosi.
Solo titoli elevati di IgM sono suggestivi della presenza di
un'infezione acuta, che nel gatto di solito è accompagnata
dall'escrezione di oocisti nelle feci. Dal momento che generalmente
l'organismo non riesce a eliminare l'agente patogeno, la
maggior parte degli animali infetti rimane sieropositivo (IgG) per
tutta la vita e, a causa della continua esposizione all'antigene,
spesso anche con titoli anticorpali alti. Questo rende inutile
l'impiego dei controlli sul siero prelevati a distanza di tempo
l'uno dall'altro per rilevare un aumento dei titoli per cercare di
stabilire se la malattia è in atto.
Si tenga conto del fatto che anche un risultato positivo della
PCR non sempre è probante per un'infezione acuta con T. gondii.
L'agente patogeno è stato infatti rilevato tanto nel liquor quanto
nell'umore acqueo di animali clinicamente sani! La rilevazione
di oocisti nelle feci di gatto con metodo PCR è problematica:
infatti, a causa del robusto involucro delle oocisti, con i procedimenti
chimici abituali di preparazione dei campioni di analisi
l'estrazione di DNA toxoplasmico è praticamente impossibile.
Per escludere per quanto possibile un'escrezione di oocisti, ad
esempio in caso di gravidanza della proprietaria dell'animale,
è necessario ricorrere a metodi classici come la sierologia o
l'esame microscopico delle feci.
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive
Attenzione La toxoplasmosi è una zoonosi.
Sintomi del sistema nervoso centrale: real time-PCR (1)
0,5 ml liquor
Aborti (cane/ piccoli ruminanti):
tampone vaginale, placenta, feto (SNC)
Sintomi respiratori: lavaggio bronchiale
Sintomi oculari (soprattutto gatto): umore acqueo
Febbre: 0,5 ml EB
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