verzeichnisse - ArchiMeD - Johannes Gutenberg-Universität Mainz
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5 Ergebnisse 77<br />
Proteine aus dem Reticulozyten-Extrakt durch die Immundepletion entfernt werden. Die<br />
in vitro-Transkription/-Translation bestätigte die aus der transienten Transfektion (5.5.2)<br />
erhaltenen Ergebnisse, dass es sich bei allen drei La/SS-B-cDNA-Isoformen um exprimierbare,<br />
funktionelle cDNAs handelte.<br />
Abb. 11: Immuno-Blot zur Untersuchung der drei<br />
murinen 5’-cDNA-Isoformen auf deren<br />
Expression in der in vitro-Transkription und in<br />
vitro-Translation<br />
Als Marker wurde der LMW-Marker (3.16) verwendet.<br />
1) pcDNA3-Vektor<br />
2) pcDNA3-La-Murin (Exon 2-Exon 11)<br />
3) pcDNA3-Maus-La-Ex 1a<br />
4) pcDNA3-Maus-La-Ex 1b<br />
5) pcDNA3-Maus-La-Ex 1c<br />
Zur Quantifizierung wurden die La/SS-B-Protein-Banden mit dem Programm Molecular<br />
Analyst (3.17) ausgewertet. Die Banden wurden durch einen Rahmen eingegrenzt und die<br />
Intensität der Schwärzung innerhalb des Rahmens im Vergleich zum Hintergrund des Blots<br />
berechnet. Die grafische Darstellung dieser Auswertung ist in Abb. 12 dargestellt.<br />
500<br />
450<br />
400<br />
% der Kontrolle<br />
350<br />
300<br />
250<br />
200<br />
150<br />
100<br />
50<br />
0<br />
pcDNA3<br />
pcDNA3-La-Murin (Exon 2-11)<br />
pcDNA3-Maus-La-Ex1a<br />
pcDNA3-Maus-La-Ex1b<br />
pcDNA3-Maus-La-Ex1c<br />
Abb. 12: Grafische Darstellung der densitometrischen Auswertung der murinen<br />
La/SS-B-Proteinbanden<br />
Die ermittelten OD-Werte sind in Prozent der Kontrolle (pcDNA3; Laufspur 1) dargestellt.
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