verzeichnisse - ArchiMeD - Johannes Gutenberg-Universität Mainz

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1 Einleitung
1.5.5 Die isoelektrischen Proteinformen
In der 2D-Gelelektrophorese lassen sich bis zu acht isoelektrische Proteinformen des
humanen La/SS-B mit einem pI zwischen 6 und 7,5 detektieren. Dabei sollen diese
überwiegend durch in vivo-Phosphorylierungen an den frei zugänglichen Serin-Resten
zustande kommen (CHAMBERS et al., 1988; FRANCOEUR, 1985; PIZER et al., 1983).
Threonin-Phosphorylierungen durch die Caseinkinase II sollen nach PFEIFLE et al. (1987) und
PIZER et al. (1983) in vitro-Artefakte darstellen. Nach CHAN et al. (1986) sollen alle
Phosphorylierungsstellen in der C-terminalen Proteindomäne enthalten sein.
BROEKHUIS et al. (2000) fanden mittels der hochauflösenden 2D-Gelelektrophorese 14
isoelektrische, humane La/SS-B-Proteinformen mit einem pI zwischen 6 und 7,5. Nur vier
davon lassen sich auf Phosphorylierungen zurückführen. Als Phosphorylierungsstellen kommen
Thr-302, Ser-325, Thr-362 und Ser-366 in Frage. Eine (De)Phosphorylierung beeinflusst den
Autoren zufolge die nukleäre Lokalisation des Proteins nicht. Die Bedeutung der isoelektrischen
Proteinformen bleibt unklar.
1.5.6 Evolutionäre Konservierung
Mit humanen Patientenseren konnte das La/SS-B-Protein bisher in S. cerevisiae
(LIN-MARQ und CLARKSON, 1995; YOO und WOLIN, 1994), D. melanogaster (YOO und
WOLIN, 1994; BAI et al., 1994), A. albopictus (PARDIGON und STRAUSS, 1996), X. laevis
(SCHERLY et al., 1993), M. musculus (TOPFER et al., 1993), R. norvegicus (SEMSEI et al.,
1993), Rind (PRUIJN, 1994) und Mensch (TRÖSTER et al., 1994; CHAN et al., 1989a;
CHAMBERS et al., 1988) nachgewiesen werden (PRUJIN, 1994; ST. CLAIR et al., 1991).
Der Vergleich des La/SS-B-Proteins aus Mensch und anderen Vertebraten ergibt, dass
das Protein hoch konserviert ist. Die gefundenen Homologien zum Menschen reichen von 26%
bei D. melanogaster (YOO und WOLIN, 1994), über 60% bei X. laevis (PRUIJN, 1994), bis zu
95% beim Rind (PRUIJN, 1994). X. laevis enthält zwei verschiedene La/SS-B-Proteine, LaA
und LaB, die 91% Homologie zueinander aufweisen (SCHERLY et al., 1993).
Das La/SS-B-Protein aus S. cerevisiae, bezeichnet als LHP1 (YOO und WOLIN, 1994)
oder LAH1 (LIN-MARQ und CLARKSON, 1995), weist zu dem aus D. melanogaster noch 23%
Identität auf, ist jedoch, verglichen mit dem humanen La/SS-B-Protein, am C-Terminus ca.
150 AS kürzer. Darüber hinaus zeigen das Protein YCL37c aus S. cerevisiae und das Protein
0570A aus der Reispflanze ausschließlich Homologien zur N-terminalen Region des humanen
La/SS-B-Proteins (KOONIN et al., 1994; YOO und WOLIN, 1994).