verzeichnisse - ArchiMeD - Johannes Gutenberg-Universität Mainz

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3 Materialien
SuperScript TM Preamplification System for First Strand cDNA Synthesis
(Gibco/ BRL GmbH, Eggenstein):
RNase H (2 U/µl) (aus E. coli); SuperScript ΙΙ RT (200 U/µl) (aus E. coli); 0,1 M DTT; 25 mM MgCl 2 ;
10 mM dNTP-Mix; 10x PCR-Puffer für RT; Oligo(dT)-Primer; DEPC-H 2 O
Taq-Polymerase PCR Kit (Roche, Mannheim):
Taq-DNA-Polymerase (1 U/µl) (aus Thermus aquaticus); 10x PCR-Puffer
Thermo Sequenase fluorescent labeled primer cycle sequencing kit mit 7-deaza-dGTP (Amersham,
Braunschweig):
Terminationsmix A, C, G und T (Tris/HCl; pH 9,5; Magnesiumchlorid; Tween 20; Nonidet P-40;
2-Mercaptoethanol; thermostabile Pyrophosphatase; Thermo Sequenase; dATP; dCTP; 7-deaza-dGTP;
dTTP; ddCTP; ddGTP; ddTTP)
Transfektions-Kit LipofectAMINE PLUS Reagent (Gibco/ BRL GmbH, Eggenstein):
Lipofectamin; Plus-Reagenz; genaue Zusammensetzung ist nur dem Hersteller bekannt
3.6 Puffer, Lösungen und Stammlösungen
Die Zusammensetzung von hier nicht aufgeführten Puffern finden sich in Klammern gesetzt im
Methodenteil an der jeweiligen Stelle oder können dem Protokoll des Herstellers entnommen werden.
Name
Zusammensetzung
Ampicillin
4% [w/v] in aqua dest.; sterilfiltriert; Lagerung bei -20°C
APS 10% [w/v] in aqua dest.; Lagerung bei 4°C
IPTG
500 mM in aqua dest.; sterilfiltriert; Lagerung bei -20°C
Kanamycin
5% [w/v] in aqua dest.; sterilfiltriert; Lagerung bei -20°C
NBT
7,7% [w/v] in 70% [v/v] DMF; Lagerung lichtgeschützt bei -20°C
PMSF
100 mM in Ethanol p.a.; Lagerung bei -20°C
Tetracyclin
0,5% [w/v] in 70% Ethanol; sterilfiltriert; Lagerung bei -20°C
X-Gal
10% [w/v] in DMF; sterilfiltriert; Lagerung bei -20°C
X-Phosphat (BCIP)
5% [w/v] in DMF; Lagerung lichtgeschützt bei -20°C
3.7 Flüssige und feste Medien für Bakterien und eukaryontische Zellen
LB-Medium 1% [w/v] Peptone 140; 0,5% [w/v] Hefeextrakt; 1% [w/v] Natriumchlorid; pH 7,4
LB-Agar
LB-Medium mit 1,5% [w/v] Agar Bacteriological
Kulturmedium 10% [v/v] FKS; 200 U/ml Penicillin; 50 U/ml Streptomycin; in DMEM-Medium
Einfriermedium 20% [v/v] FKS; 10% [v/v] DMSO; in DMEM-Medium
Stimulationsmedium 0,1% [v/v] BSA; 1 mM GSNO; in DMEM-Medium