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als zweiten Leserahmen den der jeweiligen La/SS-B-mRNA-Isoform. GRÖLZ (1998) und
PAUTZ (1998) konnten nachweisen, dass die alternativen Exon 1’- bzw. Exon 1’’-mRNAs eine
IRES enthielten und nach dem Modell der internen Initiation translatiert wurden. Ein artifizielles
Durchlesen (leaky scanning) oder eine Reinitiation erschien als Erklärung für die Expression
unwahrscheinlich. Bei diesen beiden mRNA-Isoformen war die interne Initiation die
Voraussetzung für die Translation.
Überraschenderweise konnte gezeigt werden, dass auch die Translation der humanen,
klassischen Exon 1-La/SS-B-mRNA durch eine IRES erfolgte (SCHÖRNER und DRATHEN,
2000; unveröffentlicht; GRÖLZ, 1998; PAUTZ, 1998), obwohl diese mRNA nach den Kriterien
von KOZAK (1991b) gut translatierbar war und daher nicht über eine IRES verfügen müsste.
Wahrscheinlich konnte diese mRNA-Isoform sowohl nach dem scanning-Modell als auch dem
Mechanismus der internen Initiation translatiert werden. Mit Ausnahme der BIP-mRNA
(MACEJAK und SARNOW, 1991) war bisher in mRNA-Molekülen, die eine gut scannbare
5’-UTR besaßen, noch keine IRES detektiert worden.
Somit konnten die humanen, alternativen mRNAs von La/SS-B, das mutmaßlich selbst
einen Faktor für die interne Initiation darstellte, selbst intern initialisiert werden. Es wäre
vorstellbar, dass zu Zeiten, in denen die von der 5’-Kappe abhängige Translation nach dem
scanning-Modell nicht möglich war, die Produktion von La/SS-B-Protein durch interne Initiation
erfolgte. Dies könnte z.B. immer dann der Fall sein, wenn der Faktor eIF-4E
unterphosphoryliert vorlag (GRÖLZ, 1998).
Es stellte sich die Frage, in welcher Region der humanen La/SS-B-mRNA die
Information lag, die dafür verantwortlich war, dass in dicistronen Konstrukten eine interne
Initiation des zweiten Leserahmens stattfand und warum diese ausschließlich an dem
Start-AUG in Exon 2 begann. Es wurde vermutet, dass die Region unterhalb der Sequenz des
Exon 1 bzw. des Exon 1’ oder Exon 1’’ lag, da eine interne Initiation der humanen mRNA von
La/SS-B auch ohne die Sequenz des Exon 1 bzw. Exon 1’ oder Exon 1’’ möglich war (GRÖLZ,
1998; PAUTZ, 1998). Dass die Lage einer IRES nicht auf die 5’-UTR einer mRNA beschränkt
sein musste, war schon für die IRES des Hepatitis-C-Virus gezeigt worden. Diese erstreckt sich
bis in den codierenden Bereich der mRNA (REYNOLDS et al., 1995). PAUTZ (1998) konnte
zeigen, dass eine Beteiligung der C-terminalen Nukleotidsequenz des humanen La/SS-B nicht
auszuschließen war. Somit könnte auch die 3’-Region bei der Initiation der Translation einen
Einfluß haben. In der Tat gab es Hinweise auf eine Bedeutung von 3’-Elementen an der
internen Initiation, wie z.B. für die virale mRNA des Gelben-Gersten-Zwergwuchs-Virus (barley
yellow dwarf virus) gezeigt werden konnte (WANG et al., 1997) gezeigt.
In Analogie zum humanen La/SS-B erfolgte die Untersuchung der Existenz einer
möglichen IRES am Start-AUG im Exon 2 bei den murinen La/SS-B-cDNA-Isoformen ebenfalls
durch dicistrone Konstrukte. Es wurden Konstrukte hergestellt, bestehend aus dem
CAT-Leserahmen und dem Leserahmen der verschiedenen 5’-UTRs der murinen
La/SS-B-cDNAs. Als Modellsystem zur Untersuchung einer möglichen internen Initiation der