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6 DISKUSSION
A) Analyse des murinen La/SS-B auf genomischer Ebene
Im Zusammenhang mit der genomischen Situation sollte die Organisation des murinen
La/SS-B-Strukturgens aufgeklärt werden, damit u.a. Rückschlüsse auf die Transkription
gezogen werden konnten. Von besonderem Interesse war, zu kären, ob die Möglichkeit der
Existenz eines zweiten, alternativen Promotors neben dem eigentlichen Basis-Promotor
gegeben war und welche mRNA-Isoformen von diesem aus transkribiert werden könnten. In
diesem Zusammenhang war die Aufklärung des splice-Mechanismus, der für die Entstehung
der mRNA-Isoformen verantwortlich war, von großer Bedeutung.
6.1 Allgemeine Merkmale des Strukturgens
Das La/SS-B codierende Gen des Menschen und der Maus lagen jeweils auf dem
Chromosom 2 (PRUIJN, 1994; TOPFER et al., 1993; CHAMBERS et al., 1988) (1.5.1 und 1.6).
Beide Gene codierten für 13 Exons (PRUIJN, 1994; TOPFER et al., 1993; CHAMBERS et al.,
1988) (Abb. 5 und 8.1). Neben dem eigentlichen Gen existierten im humanen Genom drei
La/SS-B-Retropseudogene, die vermutlich nach reverser Transkription von La/SS-B-mRNAs in
das Genom integriert wurden und von invertierten Sequenzwiederholungen eingerahmt waren
(BARTSCH 1997; GRÖLZ et al., 1997c) (1.5.1). TOPFER et al. (1993) beschrieben dagegen
das murine La/SS-B-Gen als single copy-Gen. Die Untersuchung von drei Mausstämmen ergab
keine Hinweise auf Restriktionsfragmentlängenpolymorphismen (TOPFER et al., 1993) (1.6).
Die ermittelte Sequenz des murinen La/SS-B-Gens wurden mit FASTA-Mail
(EMBL-Datenbank, U.K., FASTA@EBI.AC.UK) auf Homologien zu bekannten Sequenzen
untersucht. Allerdings konnten keine ermittelt werden. Im Gegensatz dazu wurde von GRÖLZ
(1998) gezeigt, dass die humane La/SS-B-Gensequenz eine Reihe von Alu-Sequenzen in den
2 kb stromaufwärts des Exon 1, sowie in den Introns 1, 2, 4, 6 und 8 enthielt (8.1).
6.2 Sequenzunterschiede
Zwischen der erhaltenen murinen Gen-Sequenz (Abb. 5) und der Sequenz von
TOPFER et al. (1993) (GenBank accession No. L00993) wurden im Exon 1b und im Exon 11
Unterschiede in der Nukleotidsequenz festgestellt (Abb. 26). Hierbei handelte es sich um
Punktmutationen, die allerdings nicht den codierenden Bereich betrafen und vermutlich auf
Sequenzierfehler zurückzuführen waren, die im Rahmen jeder Sequenzierung auftraten.