verzeichnisse - ArchiMeD - Johannes Gutenberg-Universität Mainz

5 Ergebnisse 89
Die Darstellung des Immuno-Blots der 2D-Elektrophorese von rek. murinem
La/SS-B-Protein findet sich Abb. 19. Hierbei ließen sich 13 isoelektrische Proteinformen mit
einem pI zwischen 4,5 und 5,5 detektieren.
Abb. 19: Hochauflösende 2D-Gelelektrophorese mit rek. murinem La/SS-B-Protein
Da bei der 2D-Gelelektrophorese mit murinem NIH-3T3-Zellextrakt insgesamt 16
isoelektrische Formen des murinen La/SS-B-Proteins, von BROEKHUIS et al. (2000) aber nur
14 isoelektrische Formen des humanen La/SS-B-Proteins detektiert werden konnten, sollte mit
einer 2D-Gelelektrophorese eines humanen HeLa-Zellextrakts überprüft werden, ob nicht
ebenfalls 16 isoelektrische La/SS-B-Proteinformen existierten. Vielleicht konnten die Autoren
nicht alle isoelektrische Formen des humanen La/SS-B-Proteins detektieren, da über den mAK
SW5 (3.12) aufgereinigte, humane Zellextrakte verwendet worden waren.
Die Herstellung des humanen HeLa-Zellextraktes und die Durchführung der
2D-Gelelektrophorese erfolgte wie bei dem murinen NIH-3T3-Zellextrakt. Der Immuno-Blot der
2D-Gelelektrophorese mit humanem HeLa-Zellextrakt ist in Abb. 20 dargestellt. Als
MW-Standard wurden 20 µg eukaryontisches, rek. humanes La/SS-B-Protein (3.19) auf das
Gel aufgetragen. Es konnten 16 isoelektrische Proteinformen mit einem pI zwischen 6,0 und
6,8 detektiert werden. Alle Proteine besaßen das erwartete MW von etwa 50 kDa.
Abb. 20: Hochauflösende 2D-Gelelektrophorese mit HeLa-Zellextrakt
Zusammengefasst zeigten die hier erhaltenen Ergebnisse folgendes: Eukaryontisches,
posttranslational modifiziertes, murines La/SS-B-Protein ließ sich in der 2D-Gelelektrophorese
in 16 isoelektrische Proteinformen auftrennen. Selbst rek. murines La/SS-B-Protein lieferte