verzeichnisse - ArchiMeD - Johannes Gutenberg-Universität Mainz

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würden nur fünf AS gebildet werden, bevor wiederum ein Stop-TAG die Translation
unterbrechen würde. Begann die Translation am letzten Start-AUG, das sich im
La/SS-B-Leserahmen befand, so würden nur 12 AS entstehen, bevor ein Stop-TGA die
Translation beenden würde. Nach dem leaky scanning-Modell von KOZAK könnte die
Translation auf Grund dieser sehr kurzen Aufwärtsleserahmen trotzdem immer am eigentlichen
Start-AUG im Exon 2 erfolgen. Somit wäre eine interne Initiation der Translation auch bei dieser
verlängerten Exon 1c-mRNA nicht zwingend notwendig.
Des weiteren besaß das murine La/SS-B im Exon 2 mit der Nukleotidsequenz
ACAAUGG (das Start-AUG ist unterstrichen) die von KOZAK (1987) ermittelte optimale
Ribosombinde-Konsensussequenz (ANNAUGG), was als ein Hinweis für das scanning-Modell
gewertet werden konnte. Allerdings enthielt auch das humane La/SS-B diese optimale
Konsensussequenz. Der einzige Unterschied bestand darin, dass beim humanen La/SS-B das
Adenin in Position –3 durch ein Guanin ersetzt war. Ob dieser geringfügige Unterschied
allerdings dafür verantwortlich war, dass das humane La/SS-B-Protein durch eine interne
Translationsinitiation exprimiert wurde, war sehr fraglich. Nach KOZAK (1991a) sollte ein
solcher Austausch, bei dem ein Purin durch ein anderes Purin ersetzt wurde, keinen Einfluß auf
Initiation der Translation am ersten Start-AUG haben.
Auch die Länge der murinen, alternativen Exon 1 entsprachen mit 86 (Exon 1a) (GRÖLZ
und BACHMANN, 1997d; unveröffentlicht; GenBank accession No Y07951), 113 (Exon 1b)
(TOPFER et al., 1993; GenBank accession No. L00993) und 80 Nukleotiden (Exon 1c)
(TOPFER et al., 1993) bzw. 225 Nukleotiden (MARRA et al., 1996; unveröffentlicht; GenBank
accession No AA798418) der von KOZAK (1991a) postulierten optimalen Länge, um für die
40S-Untereinheit eine gut scannbaren und damit translatierbaren mRNA darzustellen.
Ein weiterer Grund für das Fehlen einer IRES bei den murinen
La/SS-B-cDNA-Isoformen könnte im C-terminalen Bereich des codierenden Leserahmens
liegen. PAUTZ (1998) konnte zeigen, dass die interne Translationsinitiation des humanen
La/SS-B einer dicistronen mRNA deutlich verschlechtert war, wenn der C-terminale, codierende
Leserahmen deletiert war. Dies wies darauf hin, dass der C-Terminus zumindest einen
positiven Effekt auf eine interne Initiation der Translation besaß. Auch könnten IRES-Elemente
vollständig im C-Terminus lokalisiert sein. Dass sich beim murinen La/SS-B keine interne
Translationsinitiation nachweisen ließ, könnte an der im Vergleich zum humanen La/SS-B
anderen Nukleotidabfolge hängen. Der C-Terminus des murinen und humanen
La/SS-B-Proteins wiesen nämlich nur noch zu 65% Homologie auf (1.6).
Zusammengefasst konnte folgendes festgehalten werden: Da das zweite, für La/SS-B
codierende Cistron, nie translatiert wurde, ließ dies die Schlussfolgerung zu, dass die murinen
La/SS-B-cDNAs keine IRES besaßen, die eine interne Translationsinitiation am Start-AUG im
Exon 2 ermöglichte. Die murinen mRNA-Isoformen ließen sich mit dem scanning-Modell zur
Initiation der Translation bei Vertebraten sehr gut in Einklang bringen. Eine Notwendigkeit der
internen Initiation der Translation bestand nicht.