Godište 35 supplement 2 - Institut za reumatologiju
Godište 35 supplement 2 - Institut za reumatologiju
Godište 35 supplement 2 - Institut za reumatologiju
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
US 03<br />
CITOLOŠKI NALAZ INDUKOVANOG SPUTUMA KOD BOLESNIKA SA SISTEMSKOM SKLEROZOM I<br />
OŠTEĆENJEM PLUĆA<br />
Predrag Ostojić, Nemanja Damjanov, Maja Zlatanović<br />
<strong>Institut</strong> <strong>za</strong> <strong>reumatologiju</strong> - Beograd<br />
Cilj rada: da se uporedi citološki nalaz indukovanog sputuma kod bolesnika sa sistemskom sklerozom (SSc) i zdravih osoba<br />
Bolesnici i metode: u istraživanje je uključeno 28 bolesnika sa SSc i smanjenim transfer-faktorom <strong>za</strong> ugljenmonoksid<br />
(DLCO), prosečne starosti 53.3 godine. Kontrolnu grupu činilo je 11 zdravih osoba ili bolesnika sa degenerativnim<br />
reumatizmom, prosečne starosti 42.1 godine. Kriterijumi isključenja iz studije <strong>za</strong> obe podgrupe bili su: pušenje, druge bolesti<br />
sistema <strong>za</strong> disanje (sarkoido<strong>za</strong>, TBC, maligniteti,...) kao i respiratorne infekcije u poslednjih mesec dana pred uključivanje.<br />
Sputum je indukovan udisanjem hipertonog rastvora kuhinjske soli (4.5% NaCl) u trajanju od 3x20 minuta. Bolesnici su<br />
sputum iskašljavali u sterilnu posudu. Izmerena je <strong>za</strong>premina sputuma, a uzorku je dodata ista količina rastvora Sputolizina® i<br />
fosfatnog pufera (PBS) u odnosu 1:10, čiji je <strong>za</strong>datak bio da homogenizuje sputum, razloži mukus i oslobodi ćelije.<br />
Centrifugiranjem (1500/min u trajanju od 7 minuta) odvojene su ćelije od tečnog dela sputuma. Nakon resuspenzije ćelija u<br />
2ml PBS, uzorak je filtriran kroz sterilnu najlonsku gazu, čije su pore veličine 100µm, u cilju razdvajanja krupnijih epitelnih od<br />
sitnijih <strong>za</strong>paljenskih ćelija. Zatim je pomešano 50 µl ćelijske suspenzije i 150 µl Tripan-plavog, a ćelije su brojane u<br />
Neubauerovoj komori hemocitometra. Određen je ukupan broj ćelija, a među njim broj živih i mrtvih ćelija. Od ostatka<br />
suspenzije pravljeni su citospin preparati, koji su potom bojeni May-Grűnwald-Giemsa tehnikom. Brojali smo svaku vrstu<br />
<strong>za</strong>paljensku ćelije posebno i rezultat iska<strong>za</strong>li kao učestalost pojedinih u ukupnom broju <strong>za</strong>paljenskih ćelija.<br />
Rezultati: ukupan broj <strong>za</strong>paljenskih ćelija u 1 ml sputuma bio je značajno veći kod bolesnika sa SSc u odnosu na kontrolnu<br />
grupu (1.99 vs. 0.71 x 10 6 /ml, p=0.02). Odnos živih i mrtvih ćelija se nije razlikovao u dve podgrupe bolesnika. Procenat<br />
makrofaga bio je značajno veći u kontrolnoj grupi u odnosu na bolesnike sa SSc (74.3% vs 41.1%, p