24.02.2013 Views

Godište 35 supplement 2 - Institut za reumatologiju

Godište 35 supplement 2 - Institut za reumatologiju

Godište 35 supplement 2 - Institut za reumatologiju

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

US 03<br />

CITOLOŠKI NALAZ INDUKOVANOG SPUTUMA KOD BOLESNIKA SA SISTEMSKOM SKLEROZOM I<br />

OŠTEĆENJEM PLUĆA<br />

Predrag Ostojić, Nemanja Damjanov, Maja Zlatanović<br />

<strong>Institut</strong> <strong>za</strong> <strong>reumatologiju</strong> - Beograd<br />

Cilj rada: da se uporedi citološki nalaz indukovanog sputuma kod bolesnika sa sistemskom sklerozom (SSc) i zdravih osoba<br />

Bolesnici i metode: u istraživanje je uključeno 28 bolesnika sa SSc i smanjenim transfer-faktorom <strong>za</strong> ugljenmonoksid<br />

(DLCO), prosečne starosti 53.3 godine. Kontrolnu grupu činilo je 11 zdravih osoba ili bolesnika sa degenerativnim<br />

reumatizmom, prosečne starosti 42.1 godine. Kriterijumi isključenja iz studije <strong>za</strong> obe podgrupe bili su: pušenje, druge bolesti<br />

sistema <strong>za</strong> disanje (sarkoido<strong>za</strong>, TBC, maligniteti,...) kao i respiratorne infekcije u poslednjih mesec dana pred uključivanje.<br />

Sputum je indukovan udisanjem hipertonog rastvora kuhinjske soli (4.5% NaCl) u trajanju od 3x20 minuta. Bolesnici su<br />

sputum iskašljavali u sterilnu posudu. Izmerena je <strong>za</strong>premina sputuma, a uzorku je dodata ista količina rastvora Sputolizina® i<br />

fosfatnog pufera (PBS) u odnosu 1:10, čiji je <strong>za</strong>datak bio da homogenizuje sputum, razloži mukus i oslobodi ćelije.<br />

Centrifugiranjem (1500/min u trajanju od 7 minuta) odvojene su ćelije od tečnog dela sputuma. Nakon resuspenzije ćelija u<br />

2ml PBS, uzorak je filtriran kroz sterilnu najlonsku gazu, čije su pore veličine 100µm, u cilju razdvajanja krupnijih epitelnih od<br />

sitnijih <strong>za</strong>paljenskih ćelija. Zatim je pomešano 50 µl ćelijske suspenzije i 150 µl Tripan-plavog, a ćelije su brojane u<br />

Neubauerovoj komori hemocitometra. Određen je ukupan broj ćelija, a među njim broj živih i mrtvih ćelija. Od ostatka<br />

suspenzije pravljeni su citospin preparati, koji su potom bojeni May-Grűnwald-Giemsa tehnikom. Brojali smo svaku vrstu<br />

<strong>za</strong>paljensku ćelije posebno i rezultat iska<strong>za</strong>li kao učestalost pojedinih u ukupnom broju <strong>za</strong>paljenskih ćelija.<br />

Rezultati: ukupan broj <strong>za</strong>paljenskih ćelija u 1 ml sputuma bio je značajno veći kod bolesnika sa SSc u odnosu na kontrolnu<br />

grupu (1.99 vs. 0.71 x 10 6 /ml, p=0.02). Odnos živih i mrtvih ćelija se nije razlikovao u dve podgrupe bolesnika. Procenat<br />

makrofaga bio je značajno veći u kontrolnoj grupi u odnosu na bolesnike sa SSc (74.3% vs 41.1%, p

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!