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DISKUSSION
der Fieberentwicklung erreicht werden konnte, waren auch nicht alle Tiere der
Versuchsgruppe fieberfrei [Hammond, 2001]. Die gewonnenen Daten lassen keinen
direkten positiven Effekt für das inserierte IL-18 bzw. den CD40L erkennen, da schon
bei Immunisierung mit den pcDNA4HisMax-E2-Konstrukten eine starke
Fieberreduktion induziert wird.
Bei der Auswertung der Organ- und Blutproben zeigten sich sowohl die Stärke der
CSFV-Infektion (Gruppe 4) als auch die Induktion einer CSFV-spezifischen
Immunantwort der Gruppen 5, 7 und 8. Der Nachweis von CSFV in Blut und
Organproben von Tieren, die mit dem pcDNA4HisMax-E2-IL-12 Konstrukt
immunisiert wurden (854, 801), unterstreicht die Abhängigkeit eines wirksamen
Schutzes von der Induktion einer CSFV-spezifischen humoralen Immunantwort.
Diese Daten zeigen im Gegensatz zu Experimenten mit anderen E2-DNA-Vakzinen
[Andrew, 2000] bzw. einem rekombinanten E2-Adenovirus [Hammond, 2001], dass
durch eine DNA-Vakzine immunisierte Tiere vor einer Virämie geschützt werden
können, wobei man einräumen muss, dass dieser Effekt auch stark vom verwendeten
Immunisierungsschema abhängig ist [Hammond, 2001].
Anders als bei Immunisierungsversuchen mit einer E2-Marker-Vakzine [Dewulf,
2001] konnte durch die hergestellten Konstrukte (Gruppen 5, 6, 7 und 8) eine
horizontale Virusausbreitung verhindert werden. Der Aspekt einer vertikalen
Ausbreitung wurde im Rahmen dieser Studie nicht behandelt, wird aber Gegenstand
weiterer Untersuchungen sein. Da bei dem verwendeten Immunisierungsschema schon
bei dem E2-Grundkonstrukt keinerlei Virusausscheidung detektiert werden konnte,
war es nicht möglich, die Verhinderung der Virusausscheidung auf die zusätzlich
inserierten immunstimulatorischen Moleküle zurückzuführen.
Die durchgeführte FACS-Analyse bestätigte den für die Kontrollgruppe (4) sowie für
Tiere der Gruppen 5 und 6 erwarteten Befund einer CSFV-spezifischen B-Zell-
Depletion [Meyer, 1999; Susa, 1992]. Außerdem konnte ein Unterschied in der
Reaktion der B-Zell-Populationen zwischen den mit den E2-IL-18- bzw. E2-CD40L-
Konstrukten und den mit dem E2-Grundkonstrukt immunisierten Tieren beobachtet
werden. Während für das E2-Konstrukt am vierten Tag post challenge eine leichte B-
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