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PDF 5.972kB - TOBIAS-lib - Universität Tübingen

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ZUSAMMENFASSUNG<br />

pcDNA4HisMax-E2-IL-18 Konstrukt eine Steigerung der CSFV-spezifischen<br />

Immunantwort aufgrund des inserierten immunstimulatorischen Moleküles.<br />

Ein weiterer Aspekt dieser Arbeit bestand in der pro- und eukaryontischen Expression<br />

der für die DNA-Vakzine eingesetzten immunstimulatorischen bzw. CSFV-<br />

spezifischen Moleküle. Im Verlauf dieses Projektes gelang es, porcines IL-18, den<br />

CD40L sowie die p40 Untereinheiten des IL-12, prokayontisch zu exprimieren,<br />

aufzureinigen und über Western Blot bzw. Immunfluoreszenz nachzuweisen. Das<br />

exprimierte und aufgereinigte IL-18 und der CD40L wurden zur Gewinnung<br />

spezifischer polyklonaler Seren eingesetzt. Für die p35-Untereinheit des IL-12-, und<br />

das E2-Glykoprotein gelang ein Nachweis der Expression als GST-(p35) bzw. (E2)-<br />

Fusionsprotein durch Western Blot Analyse. Außerdem wurden für die eukaryontische<br />

Expression der Moleküle stabile 293-Zelllinien hergestellt und die Expression der<br />

CD40L, IL-18 und IL-12-Gene durch Immunfluoreszenzanalyse, Radio-<br />

immunpräzipitation, Western Blot bzw. über funktionelle Tests nachgewiesen.<br />

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