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MATERIAL Kanamycin Sigma L-15 Life Technologies Leupeptin Boehringer Mannheim Ni 2+ -NTA-Agarose Qiagen Nonidet P40 Boehringer Mannheim Nukleosidtriphosphate Roche Orange G Fluka OPD Sigma peqGOLD TriFast TM Peqlab Tris-gesättigtes Phenol für DNA-Extraktion AppliChem, Roth H2O-gesättigtes Phenol für RNA-Extraktion AppliChem, Roth Pefablock SC PMSF Roth 98 Boehringer Mannheim Prestained-SDS-PAGE Proteinlängenmarker Bio-Rad, New England Biolabs Szintillationsflüssigkeit rotiszint ecoplus Roth SDS-PAGE Proteinlängenmarker Bio-Rad, New England Biolabs TEMED Sigma Triton X-100 Sigma Xylencyanol Fluka Zusätze für Zellkultur Doxycyclin Sigma FCS (fötales Kälberserum) PAA Geneticin (G418) Sigma Penicillin G Grünenthal Streptomycin Hefa Pharma Wasserstoffperoxid Merck Zeocin Invitrogen Alle nicht gesondert aufgeführten Chemikalien wurden von den Firmen Merck, Roth, Sigma oder Scharlau bezogen.
5.8 Radioaktive Substanzen MATERIAL (Methyl- 3 H)-Thymidin Amersham Buchler Na2 51 CrO4 Amersham Buchler Tran [ 35 S] Label Mix ICN [ 35 S] L-Methionin ICN 5.9 Verbrauchsmaterial Chromatographiepapier 3 mm Whatman Dialysierschläuche Serva, Roth Elektroporationsküvetten Eurogentec Kanülen und Plastikspritzen Bachhofer, Braun, Terumo Kieselgelplatte F254 99 Merck Mikroreaktionsgefäße Eppendorf Nitrozellulose Schleicher & Schuell Nylon-Membran, positiv geladen Roche Pipettenspitzen Greiner Röntgenfilme BioMax MR Kodak Sep-Pak C18 Cartidges Waters Zellkulturplastikwaren Greiner Zentrifugenröhrchen Beckman Instruments Mikrotiterplatten, Rundboden Greiner Mikrotiterplatten, Flachboden Greiner Nunc-Immuno Plate Maxisorb Nunc Szintilationsfilter Wallac Feststoffszintilator Meltilex A Wallac 5.10 Geräte und Laborhilfsmittel ABI-PRISM 377 DNA Sequencer Perkin Elmer Begasungsbrutschrank Heraeus Liquid Scintillation Counter Wallac
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DNA-Vakzinierung gegen classical sw
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Die vorliegende Arbeit wurde unter
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3.3 Analyse der DNA-Vakzine-Konstru
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6.5 Präparation und Analyse von RN
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ABKÜRZUNGEN 6xHis Hexahistidin Abb
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1 ZUSAMMENFASSUNG ZUSAMMENFASSUNG D
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2 EINLEITUNG 2.1 DNA-Immunisierung
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EINLEITUNG Proben erforderlich) ein
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EINLEITUNG Zellproliferation und Di
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2.3 Interleukin 18 2.3.1 Struktur E
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2.4 CD40-Ligand 2.4.1 Struktur EINL
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EINLEITUNG 2.5.2 Genomorganisation
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3 ERGEBNISSE 3.1 Konstruktherstellu
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ERGEBNISSE 3.1.2 Herstellung der E2
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ERGEBNISSE Abb. 3-3: RT-PCR für di
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ERGEBNISSE Abb. 3-4: Konstruktion d
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ERGEBNISSE Zur Entnahme der komplet
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ERGEBNISSE Nach Abschluß der Konst
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ERGEBNISSE Abb. 3-7: Gelanalyse der
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ERGEBNISSE Abb. 3-8: E2-Expressions
Seite 43 und 44:
ERGEBNISSE 3.2.4 Nachweis der IL-18
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%spezifische Lyse %spezifische Lyse
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ERGEBNISSE 1998; Smooker, 1999]. De
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ERGEBNISSE Von den Tieren wurden w
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• Serumneutralisationstest ERGEBN
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ERGEBNISSE • IgG1/IgG2-isotypspez
Seite 55 und 56:
ERGEBNISSE • IFN-γ-ELISA und IFN
Seite 57 und 58:
ERGEBNISSE Deshalb wurde im dritten
Seite 59 und 60: ERGEBNISSE Vergleich der Tiere der
Seite 61 und 62: ERGEBNISSE Konstrukte. Daher wurden
Seite 63 und 64: ERGEBNISSE Antikörpertiter vor -un
Seite 65 und 66: ERGEBNISSE 3.3.3.2 Klinischer Verla
Seite 67 und 68: Temperatur 42 41,5 41 40,5 40 39,5
Seite 69 und 70: ERGEBNISSE Gruppe Tier-Nr. 4. Tag 7
Seite 71 und 72: ERGEBNISSE Antikörper und virusfre
Seite 73 und 74: ERGEBNISSE mehrerer anderer Zellfra
Seite 75 und 76: ERGEBNISSE Nach Transformation von
Seite 77 und 78: ERGEBNISSE Abb. 3-27: Klonierungssc
Seite 79 und 80: ERGEBNISSE 3.4.2.2 Expression der p
Seite 81 und 82: ERGEBNISSE Aufgrund der geringen Au
Seite 83 und 84: ERGEBNISSE CD40L (Abb. 3-35 A) spez
Seite 85 und 86: ERGEBNISSE Abb. 3-36: Analyse resis
Seite 87 und 88: ERGEBNISSE Abb. 3-37: Analyse der I
Seite 89 und 90: 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0
Seite 91 und 92: ERGEBNISSE Abb. 3-40: E2-Expression
Seite 93 und 94: DISKUSSION E2-Poxvirus [Hahn, 2001]
Seite 95 und 96: DISKUSSION Der Nachweis der sekreti
Seite 97 und 98: DISKUSSION Testsystemen nach erfolg
Seite 99 und 100: DISKUSSION Versuchsansätzen wurde
Seite 101 und 102: DISKUSSION Zell-Depletion zu verzei
Seite 103 und 104: DISKUSSION p35-Untereinheit zeigte
Seite 105 und 106: 5 MATERIAL MATERIAL 5.1 Bakterienst
Seite 107 und 108: ● Linker MATERIAL SmaI SV40 Hpa I
Seite 109: MATERIAL Ziege-anti-Kanninchen IgG,
Seite 113 und 114: 5.10.1 Zentrifugen MATERIAL Biofuge
Seite 115 und 116: 6.1.3 Transformation METHODEN Für
Seite 117 und 118: Transfektionsmethoden METHODEN •
Seite 119 und 120: METHODEN 12000 rpm). Nach den Extra
Seite 121 und 122: METHODEN 6.4.5 Abdau überhängende
Seite 123 und 124: METHODEN Reaktions“kugeln“ enth
Seite 125 und 126: METHODEN peratur inkubiert. Nach Zu
Seite 127 und 128: METHODEN konstante Geltemperatur vo
Seite 129 und 130: METHODEN 6.5.2 RNA-Agarosegelelektr
Seite 131 und 132: METHODEN 6.6.2 Diskontinuierliche S
Seite 133 und 134: METHODEN Nitrozellulosemembran in 3
Seite 135 und 136: METHODEN induzierbare Expression de
Seite 137 und 138: METHODEN Reinheit und ihren Protein
Seite 139 und 140: METHODEN ● Organe: Je 500 mg eine
Seite 141 und 142: METHODEN 6.12.2.3 Nachweis der IL-1
Seite 143 und 144: 6.12.3.4 Serumneutralisationstest M
Seite 145 und 146: METHODEN stellt ein relatives Maß
Seite 147 und 148: ANHANG 610 630 650 TCGGAGAGAATCTTAC
Seite 149 und 150: LITERATUR Birnboim, H.C., Doly, J.
Seite 151 und 152: LITERATUR D´Andreas, A., Rengaraju
Seite 153 und 154: LITERATUR Gately, M.K., Warrier, R.
Seite 155 und 156: LITERATUR Harkness, J. W. & Roeder,
Seite 157 und 158: LITERATUR Kobayashi, M., Fitz, L.,
Seite 159 und 160: LITERATUR Makoff, A.J., Oxer, M.D.,
Seite 161 und 162:
LITERATUR Nobiron, I., Thompson, I.
Seite 163 und 164:
LITERATUR Ruiz, P.J., Garren, H., R
Seite 165 und 166:
LITERATUR Sypek, J.P., Chung, C.L.,
Seite 167 und 168:
LITERATUR Wei, W.Z., Shi, W.P., Gal
Seite 169:
Persönliche Daten Name: Daniel Wie
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