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ERGEBNISSE
• IgG1/IgG2-isotypspezifischer ELISA
Durch Untersuchungen an B-Zellen ist bekannt, dass die T-Helferzellpopulationen
durch die von ihnen ausgeschütteten Zytokine einen Immunglobulin-Klassenwechsel
auslösen können [Stavnezer, 1996]. Das von TH1-Zellen gebildete IFN-γ z.B. induziert
die Bildung von IgG2a- und hemmt die Bildung von IgG1-Antikörpern, während das
von TH2-Zellen ausgeschüttete IL-4 einen gegensätzlichen Effekt zeigt. Durch
Bestimmung der Klasse der E2-spezifischen Antikörper könnte eine Unterscheidung
zwischen einer TH1- bzw. TH2-induzierten humoralen Immunantwort ermöglicht
werden. Deshalb wurde ein IgG1- und IgG2-spezifischer ELISA etabliert und die
Seren der Tiere 45, 48, 170 und 173 in verschiedenen Verdünnungen (unverdünnt,
1:50, 1:100) ausgetestet. Dabei diente das negative Serum von Tier 45 als Kontrolle.
Für alle Seren außer für die Negativkontrolle wurden IgG1- und IgG2-E2-spezifische
Antikörper nachgewiesen (Abb. 3-14), was sowohl auf eine TH1- als auch TH2-
induzierte humorale Immunantwort hindeutet. Die Induktion durch eine dominierende
T-Helferpopulation konnte nicht bestätigt werden.
OD
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
IgG1/IgG2
45 48 170 173
Tiernummer
41
IgG1
IgG2
Abb. 3-14: IgG1/IgG2-spezifische Differenzierung der humoralen Immunantwort. Die Säulen
geben den im ELISA gemessenen OD-Wert für die einzelnen Seren wieder. Die Seren wurden
in dem Test unverdünnt eingesetzt. Als Primärantikörper diente ein monoklonaler antiporciner
IgG1- bzw. IgG2-Maus-Antikörper. Die Detektion erfolgte anschließend durch ein
Ziege-anti-Maus-POD-gekoppeltes Antiserum. Beim Test wurde das Serum von Tier 45
(pcDNA4HisMax ) als Negativkontrolle verwendet.