PDF 5.972kB - TOBIAS-lib - Universität Tübingen
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ERGEBNISSE<br />
• IFN-γ-ELISA und IFN-γ-ELISPOT<br />
Ein weiterer Parameter für die Induktion der zellulären Immunantwort ist die IFN-γ-<br />
Ausschüttung durch aktivierte TH1-Zellen. Versuche mit CSFV-infizierten Tieren,<br />
deren PBMC gewonnen und anschließend in vitro mit CSFV restimuliert wurden,<br />
zeigten einen Anstieg der IFN-γ-Ausschüttung durch aktivierte TH1-Zellen [Armengol,<br />
2001]. Deshalb wurde der Versuch unternommen, eine mögliche Induktion der<br />
zellulären Immunantwort nach DNA-Vakzinierung über den Anstieg der IFN-γ-<br />
Ausschüttung nach CSFV-Restimulation im IFN-γ-ELISA und IFN-γ-ELISPOT<br />
nachzuweisen. Durch den eingesetzten IFN-γ-ELISA sollte die sekretierte Menge an<br />
IFN-γ erfasst werden, während durch den IFN-γ-ELISPOT eine Quantifizierung der<br />
sekretierenden Zellen erfolgen sollte. Drei immunisierte Tiere wurden ausgewählt,<br />
Tier 46: pcDNA4HisMax, Tier 48: pcDNA4HisMax-E2 und Tier 175:<br />
pcDNA4HisMax-E2-CD40L. Es konnte für keines der Tiere im IFN-γ-ELISA und -<br />
ELISPOT ein spezifischer Anstieg der IFN-γ-Ausschüttung vor der challenge-<br />
Infektion festgestellt werden. Nach erfolgtem challenge zeigten sich hingegen deutlich<br />
CSFV-spezifische Steigerungen der IFN-γ-Ausschüttung im IFN-γ-ELISA (Daten<br />
nicht gezeigt) und IFN-γ-ELISPOT (Abb. 3-14) für die Tiere 48 und 175. Für das als<br />
Negativkontrolle fungierende Tier 46 konnte erwartungsgemäß aufgrund der massiven<br />
Virämie und der damit verbundenen Beeinträchtigung des Immunsystems kein Anstieg<br />
der IFN-γ-Ausschüttung detektiert werden.<br />
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