PDF 5.972kB - TOBIAS-lib - Universität Tübingen

ERGEBNISSE
Antikörper und virusfreier Organ-, Blut- und Nasentupferproben. Ähnliches gilt auch
für die mit dem pcDNA4HisMax-E2-IL-12-Konstrukt immunisierte Tiergruppe. Hier
konnte ein deutlicher Rückgang der neutralisierenden Antikörpertiter im Verhältnis zu
den E2-Grundkonstrukten und die Ausprägung von klinischen Symptomen einer
CSFV-Infektion mit akutem Verlauf (siehe 3.3.2.3) beobachtet werden. Diese
Tatsache bedingt vermutlich u.a. auch den schlechten Allgemeinzustand und die
vorzeitige Sterblichkeit von 50% der Tiere. Das zusätzlich inserierte IL-12 scheint hier
als klassisches TH1-Cytokin einen negativen Effekt auf die Induktion einer CSFV-
spezifischen Immunantwort auszuüben. Die Tiere der Gruppen 7 (pcDNA4HisMax-
E2-IL-18) und 8 (pcDNA4HisMax-E2-CD40L) hingegen waren durch die DNA-
Vakzine vor einem letalen CSFV-challenge geschützt. Bei den Tieren konnten keine
klinischen Symptome einer CSFV-Infektion beobachtet werden. Außerdem stieg die
Körpertemperatur bei keinem Tier der Gruppen 7 und 8 über 40 0 C. Die verzeichneten
leichten Differenzen zwischen den Fieberkurven der E2-IL-18- bzw. E2-CD40L-
Konstrukte stimmen mit den geringen Unterschieden der induzierten neutralisierenden
Antikörpertiter prä und post challenge überein. Aufgrund der Heterogenität der
erfassten Daten und den nur geringen Unterschieden im Temperaturverlauf bzw. bei
den Antikörpertitern im Verhältnis zu dem E2-Grundkonstrukt fällt es schwer, eine
vereinzelte Verstärkung der CSFV-spezifischen Immunantwort auf das zusätzlich
inserierte IL-18 bzw. den CD40L zurückzuführen.
• Durchflußzytometrische-Analyse
Zur Erfassung der für CSFV beschriebenen B-Zell-Depletion [Meyers, 1999; Susa,
1992] wurden Blutproben zu verschiedenen Zeitpunkten nach CSFV-Infektion
entnommen und nach Markierung mittels eines CD21-spezifischen monoklonalen
Antikörpers [Denham, 1994/98] im FACS analysiert. Die Auswertung des
prozentualen Anteils der CD21 + -Zellen an den PBMC ergab erwartungsgemäß eine
starke B-Zell-Depletion für die Tiere der Kontrollgruppe (4) sowie die vorzeitig
verstorbenen Tiere der Gruppen 5 (pcDNAHisMax-E2) (Tier 806) und 6
(pcDNAHisMax-E2-IL-12) (Tier 854, 801). Für die restlichen Tiere der Gruppe 6
59