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MATERIAL Mung Bean Nuklease New England Biolabs Proteinase K Roche Restriktionsenzyme New England Biolabs, AGS, Roche RNase Inhibitor Promega RNase A Roche T4 DNA Ligase New England Biolabs T7 RNA-Polymerase Roche Taq DNA Polymerase Peqlab Für Reaktionen mit diesen Enzymen wurden die vom jeweiligen Enzymhersteller mitgelieferten Puffer eingesetzt. 5.5.2 Kits ABI TM PRISM Dye Terminator Cycle Perkin Elmer Sequencing Ready Reaction Kit Mammalian Transfection Kit Stratagene QIAquick Gel Extraction Kit Qiagen QIAquick PCR Purification Kit Qiagen Ready-to-go TM PCR Beads Amersham Pharmacia CHEKIT-CSF-SERO Hoechst IFN-γ-Cytoset Biosource International 5.6 Antiseren und Antikörper Polyklonales anti-IL-12 Kanninchenserum Endogen Monoklonaler anti-human-CD40L-Maus-Antikörper Saalmüller/Weiland BFAV Monoklonaler anti-E2-Maus-Antikörper (a18) BFAV [Weiland et al., 1990] Monoklonaler anti-E2-Maus-Antikörper (MAK 7) Weiland BFAV Monoklonaler anti-E2-Maus-Antikörper (C 46) Weiland BFAV Monoklonaler anti-porcines IgG1-Maus-Antikörper Serotec Monoklonalesr anti-porcines IgG2-Maus-Antikörper Serotec Monoklonaler anti-humanes CD21-Maus-Antikörper Pharmingen Ziege-anti-Kanninchen IgG, AP-gekoppelt Promega 96
MATERIAL Ziege-anti-Kanninchen IgG, POD-gekoppelt Bio-Rad Ziege-anti-Maus IgG, POD-gekoppelt Bio-Rad Ziege-anti-Maus IgG, DTAF-gekoppelt Jackson Immuno Research Ziege-anti-Maus IgG1, PE-gekoppelt Jackson Immuno Research 5.7 Chemikalien und Reagenzien Acrylamid-Stammlösungen AppliChem, Roth Agar Difco Agarose für Gelelektrophorese Gibco BRL Ammoniumpersulfat Serva Ampicillin Boehringer Mannheim Bacto Hefeextrakt Difco Bacto Trypton Difco Bromphenolblau Serva BSA (Rinderserumalbumin) Sigma Cäsiumchlorid Sigma Coomassie Brillant Blue G250 Serva DEPC Sigma Dithiothreitol Boehringer Mannheim DMPC Sigma DMSO Merck DOTAP Transfection Reagenz Roche EDTA, Dinatriumsalz Serva EGTA Sigma En 3 Hance DuPont Ethidiumbromid Serva FCS (fötales Kälberserum) PAA Ficoll-Paque Pharmacia Formamid, deionisiert Gibco BRL HEPES Fluka 97
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DNA-Vakzinierung gegen classical sw
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Die vorliegende Arbeit wurde unter
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3.3 Analyse der DNA-Vakzine-Konstru
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6.5 Präparation und Analyse von RN
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ABKÜRZUNGEN 6xHis Hexahistidin Abb
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1 ZUSAMMENFASSUNG ZUSAMMENFASSUNG D
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2 EINLEITUNG 2.1 DNA-Immunisierung
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EINLEITUNG Proben erforderlich) ein
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EINLEITUNG Zellproliferation und Di
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2.3 Interleukin 18 2.3.1 Struktur E
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2.4 CD40-Ligand 2.4.1 Struktur EINL
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EINLEITUNG 2.5.2 Genomorganisation
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3 ERGEBNISSE 3.1 Konstruktherstellu
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ERGEBNISSE 3.1.2 Herstellung der E2
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ERGEBNISSE Abb. 3-3: RT-PCR für di
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ERGEBNISSE Abb. 3-4: Konstruktion d
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ERGEBNISSE Zur Entnahme der komplet
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ERGEBNISSE Nach Abschluß der Konst
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ERGEBNISSE Abb. 3-7: Gelanalyse der
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ERGEBNISSE Abb. 3-8: E2-Expressions
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ERGEBNISSE 3.2.4 Nachweis der IL-18
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%spezifische Lyse %spezifische Lyse
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ERGEBNISSE 1998; Smooker, 1999]. De
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ERGEBNISSE Von den Tieren wurden w
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• Serumneutralisationstest ERGEBN
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ERGEBNISSE • IgG1/IgG2-isotypspez
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ERGEBNISSE • IFN-γ-ELISA und IFN
Seite 57 und 58: ERGEBNISSE Deshalb wurde im dritten
Seite 59 und 60: ERGEBNISSE Vergleich der Tiere der
Seite 61 und 62: ERGEBNISSE Konstrukte. Daher wurden
Seite 63 und 64: ERGEBNISSE Antikörpertiter vor -un
Seite 65 und 66: ERGEBNISSE 3.3.3.2 Klinischer Verla
Seite 67 und 68: Temperatur 42 41,5 41 40,5 40 39,5
Seite 69 und 70: ERGEBNISSE Gruppe Tier-Nr. 4. Tag 7
Seite 71 und 72: ERGEBNISSE Antikörper und virusfre
Seite 73 und 74: ERGEBNISSE mehrerer anderer Zellfra
Seite 75 und 76: ERGEBNISSE Nach Transformation von
Seite 77 und 78: ERGEBNISSE Abb. 3-27: Klonierungssc
Seite 79 und 80: ERGEBNISSE 3.4.2.2 Expression der p
Seite 81 und 82: ERGEBNISSE Aufgrund der geringen Au
Seite 83 und 84: ERGEBNISSE CD40L (Abb. 3-35 A) spez
Seite 85 und 86: ERGEBNISSE Abb. 3-36: Analyse resis
Seite 87 und 88: ERGEBNISSE Abb. 3-37: Analyse der I
Seite 89 und 90: 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0
Seite 91 und 92: ERGEBNISSE Abb. 3-40: E2-Expression
Seite 93 und 94: DISKUSSION E2-Poxvirus [Hahn, 2001]
Seite 95 und 96: DISKUSSION Der Nachweis der sekreti
Seite 97 und 98: DISKUSSION Testsystemen nach erfolg
Seite 99 und 100: DISKUSSION Versuchsansätzen wurde
Seite 101 und 102: DISKUSSION Zell-Depletion zu verzei
Seite 103 und 104: DISKUSSION p35-Untereinheit zeigte
Seite 105 und 106: 5 MATERIAL MATERIAL 5.1 Bakterienst
Seite 107: ● Linker MATERIAL SmaI SV40 Hpa I
Seite 111 und 112: 5.8 Radioaktive Substanzen MATERIAL
Seite 113 und 114: 5.10.1 Zentrifugen MATERIAL Biofuge
Seite 115 und 116: 6.1.3 Transformation METHODEN Für
Seite 117 und 118: Transfektionsmethoden METHODEN •
Seite 119 und 120: METHODEN 12000 rpm). Nach den Extra
Seite 121 und 122: METHODEN 6.4.5 Abdau überhängende
Seite 123 und 124: METHODEN Reaktions“kugeln“ enth
Seite 125 und 126: METHODEN peratur inkubiert. Nach Zu
Seite 127 und 128: METHODEN konstante Geltemperatur vo
Seite 129 und 130: METHODEN 6.5.2 RNA-Agarosegelelektr
Seite 131 und 132: METHODEN 6.6.2 Diskontinuierliche S
Seite 133 und 134: METHODEN Nitrozellulosemembran in 3
Seite 135 und 136: METHODEN induzierbare Expression de
Seite 137 und 138: METHODEN Reinheit und ihren Protein
Seite 139 und 140: METHODEN ● Organe: Je 500 mg eine
Seite 141 und 142: METHODEN 6.12.2.3 Nachweis der IL-1
Seite 143 und 144: 6.12.3.4 Serumneutralisationstest M
Seite 145 und 146: METHODEN stellt ein relatives Maß
Seite 147 und 148: ANHANG 610 630 650 TCGGAGAGAATCTTAC
Seite 149 und 150: LITERATUR Birnboim, H.C., Doly, J.
Seite 151 und 152: LITERATUR D´Andreas, A., Rengaraju
Seite 153 und 154: LITERATUR Gately, M.K., Warrier, R.
Seite 155 und 156: LITERATUR Harkness, J. W. & Roeder,
Seite 157 und 158: LITERATUR Kobayashi, M., Fitz, L.,
Seite 159 und 160:
LITERATUR Makoff, A.J., Oxer, M.D.,
Seite 161 und 162:
LITERATUR Nobiron, I., Thompson, I.
Seite 163 und 164:
LITERATUR Ruiz, P.J., Garren, H., R
Seite 165 und 166:
LITERATUR Sypek, J.P., Chung, C.L.,
Seite 167 und 168:
LITERATUR Wei, W.Z., Shi, W.P., Gal
Seite 169:
Persönliche Daten Name: Daniel Wie
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