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Persönliche Daten Name: Daniel Wienhold Geburtsdatum: 20.04.1973 Geburtsort: Zeitz Nationalität: deutsch Familienstand: ledig Schulbildung/Berufsausbildung Lebenslauf 1979-1989 Allgemeinbildende polytechnische Oberschule 1989-1992 Gymnasium Erwin Hoernle Neubrandenburg 1989-1992 Parallel Ausbildung zum Instandhaltungsmechaniker für Technologische Ausrüstungen Hochschulausbildung 1993-1995 Grundstudium im Diplomstudiengang Biologie 1995-1997 Hauptstudium und Diplomprüfung 1997-1998 Diplomarbeit an der Bundesforschungsanstalt für Viruskrankheiten der Tiere in <strong>Tübingen</strong> unter Anleitung von Prof. Dr. Pfaff Thema: Entwicklung eukaryotischer Expressionsvektoren für den Einsatz als DNA-Vakzine am Beispiel der Maul- und Klauenseuche 1999- 03/2002 Dissertation an der Bundesforschungsanstalt für Viruskrankheiten der Tiere in <strong>Tübingen</strong> unter Anleitung von Prof. Dr. Pfaff Thema: DNA-Vakzinierung gegen classical swine fever virus- Einfluß von Immunstimulatoren auf die Effizienz
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DNA-Vakzinierung gegen classical sw
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Die vorliegende Arbeit wurde unter
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3.3 Analyse der DNA-Vakzine-Konstru
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6.5 Präparation und Analyse von RN
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ABKÜRZUNGEN 6xHis Hexahistidin Abb
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1 ZUSAMMENFASSUNG ZUSAMMENFASSUNG D
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2 EINLEITUNG 2.1 DNA-Immunisierung
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EINLEITUNG Proben erforderlich) ein
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EINLEITUNG Zellproliferation und Di
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2.3 Interleukin 18 2.3.1 Struktur E
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2.4 CD40-Ligand 2.4.1 Struktur EINL
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EINLEITUNG 2.5.2 Genomorganisation
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3 ERGEBNISSE 3.1 Konstruktherstellu
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ERGEBNISSE 3.1.2 Herstellung der E2
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ERGEBNISSE Abb. 3-3: RT-PCR für di
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ERGEBNISSE Abb. 3-4: Konstruktion d
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ERGEBNISSE Zur Entnahme der komplet
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ERGEBNISSE Nach Abschluß der Konst
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ERGEBNISSE Abb. 3-7: Gelanalyse der
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ERGEBNISSE Abb. 3-8: E2-Expressions
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ERGEBNISSE 3.2.4 Nachweis der IL-18
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%spezifische Lyse %spezifische Lyse
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ERGEBNISSE 1998; Smooker, 1999]. De
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ERGEBNISSE Von den Tieren wurden w
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• Serumneutralisationstest ERGEBN
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ERGEBNISSE • IgG1/IgG2-isotypspez
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ERGEBNISSE • IFN-γ-ELISA und IFN
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ERGEBNISSE Deshalb wurde im dritten
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ERGEBNISSE Vergleich der Tiere der
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ERGEBNISSE Konstrukte. Daher wurden
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ERGEBNISSE Antikörpertiter vor -un
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ERGEBNISSE 3.3.3.2 Klinischer Verla
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Temperatur 42 41,5 41 40,5 40 39,5
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ERGEBNISSE Gruppe Tier-Nr. 4. Tag 7
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ERGEBNISSE Antikörper und virusfre
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ERGEBNISSE mehrerer anderer Zellfra
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ERGEBNISSE Nach Transformation von
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ERGEBNISSE Abb. 3-27: Klonierungssc
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ERGEBNISSE 3.4.2.2 Expression der p
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ERGEBNISSE Aufgrund der geringen Au
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ERGEBNISSE CD40L (Abb. 3-35 A) spez
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ERGEBNISSE Abb. 3-36: Analyse resis
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ERGEBNISSE Abb. 3-37: Analyse der I
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1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0
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ERGEBNISSE Abb. 3-40: E2-Expression
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DISKUSSION E2-Poxvirus [Hahn, 2001]
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DISKUSSION Der Nachweis der sekreti
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DISKUSSION Testsystemen nach erfolg
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DISKUSSION Versuchsansätzen wurde
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DISKUSSION Zell-Depletion zu verzei
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DISKUSSION p35-Untereinheit zeigte
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5 MATERIAL MATERIAL 5.1 Bakterienst
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● Linker MATERIAL SmaI SV40 Hpa I
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MATERIAL Ziege-anti-Kanninchen IgG,
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5.8 Radioaktive Substanzen MATERIAL
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5.10.1 Zentrifugen MATERIAL Biofuge
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6.1.3 Transformation METHODEN Für
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- Seite 121 und 122: METHODEN 6.4.5 Abdau überhängende
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- Seite 125 und 126: METHODEN peratur inkubiert. Nach Zu
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- Seite 143 und 144: 6.12.3.4 Serumneutralisationstest M
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