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EXPRESSION DES PPAR AU COURS DE LA
DIFFÉRENCIATION DES CELLULES Caco-2
1. ANALYSE DE LA DIFFERENCIATION CELLULAIRE DES CELLULES Caco-2
Nous avons étudié les taux traductionnels et transcriptionnels des PPAR dans la
lignée cellulaire Caco-2 à 5, 10 et 15 jours de culture. L'état de différenciation des cellules
Caco-2 est analysé grâce à des marqueurs moléculaires de différenciation comme la
saccharase/isomaltase et la phosphatase alcaline (2 enzymes de la bordure en brosse),
l'acyl-CoA oxydase (AOX) et la catalase (2 enzymes peroxysomales).
Les activités spécifiques de la saccharase/isomaltase et de la phosphatase alcaline
augmentent durant la culture cellulaire (tableau 7). L'augmentation est de 2,3 et de 5,7 fois
pour l'une et l'autre enzymes, respectivement, à 15 jours de culture comparativement aux
valeurs de départ obtenues à 5 jours de culture.
Les activités spécifiques de l'acyl-CoA oxydase et de la catalase augmentent de 1,7
et de 3 fois respectivement, entre 5 et 10 jours de culture. Les activités spécifiques de ces
deux enzymes peroxysomales restent par la suite constantes entre 10 et 15 jours de culture.
Les taux protéiques de la villine (marqueur moléculaire du développement de la bordure en
brosse), de l'acyl-CoA oxydase (AOX), de l'enzyme peroxysomale bifonctionnelle (PBE), de
la catalase et de la protéine membranaire peroxysomale de 70 kOa (PMP 70) ont été
déterminés par la technique de Western blotting avec des anticoprs polyclonaux spécifiques
(figures 25 et 26). Une bande unique de 90 kOa correspondant à la villine a été détectée
avec les homogénats cellulaires. Son intensité augmente de 2,3 fois entre 5 et 15 jours de
culture (figure 25). Trois bandes de 65,6, de 56 et de 42 kDa sont mises en évidence par
l'anticorps anti-AOX. L'intensité de la bande correspondant à la sous-unité de 56 kDa
augmente progressivement jusqu'à 3,3 fois au cours des 15 jours de culture (figure 26A).
L'anticorps anti-PBE révèle la présence d'une bande unique de 70 kOa (figure 26B). Son
intensité augmente de 2 fois au cours de la culture. Une bande de 60 kOa est détectée par
l'anticorps anti-catalase; elle correspond à un monomère de l'enzyme. Au cours de la
culture, l'intensité de cette bande augmente de 3 fois (figure 26C). Une augmentation plus
faible est observée à 10 jours pour le taux protéique de PMP70 (figure 260). Cependant,
cette augmentation n'est pas significative.
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