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Tissu sain Tumeur Témoin Cytokératine 18 Figure 45: Mise en évidence de l'expression de la cytokératine 18 et de Ki67 au niveau d'adénocarcinomes coliques. Les tissus ont été fixés dans une solution formolée et inclus dans la paraffine. Des coupes de 5 Ilm ont été réalisées et mises en incubation en présence d'anticorps primaires anti-cytokératine 18 (C et D) et anti-Ki67 (E et F) d'origine commerciale. Les complexes formés ont été mis en évidence par le montage décrit dans « Matériels et Méthodes ". Les témoins négatifs (A, B) correspondent à l'absence de l'anticorps primaire.(Les flèches indiquent la localisation du marquage) Grandissement : x10
différence significative d'expression de la protéine PPARyau niveau de tumeurs du poumon non à petites cellules (NSCLC, pour non-small cell lung carcinoma) en fonction du grade, mais aussi en fonction de l'âge et du sexe des patients. Cependant, il existe une relation significative de l'expression de PPARy en fonction du type histologique dans les tumeurs NSCLC. Les adénocarcinomes bien différenciés présentent une augmentation significative de l'expression de PPARy comparativement aux adénocarcinomes moyennement et peu différenciés [330]. Nos résultats indiquent également un modèle d'expression différent de PPARyau niveau de cellules tumorales mucosécrétantes. Dans ce type de tumeur, PPARy est exprimé beaucoup plus fortement que dans les tumeurs dont la sécrétion de mucus est faible ou dans les tumeurs pour lesquelles le mucus est absent. Ainsi, nos résultats suggèrent que la présence de PPARy peut-être corrélée au type histologique des cellules, notamment mucosécrétantes. b. Localisation cytoplasmique de PPARy dans les cellules d'adénocarcinomes coliques humains Le marquage observé au niveau des cellules tumorales coliques est exclusivement cytoplasmique. Une localisation nucléaire du marquage est obtenue in vitro avec les cellules Caco-2, cellules qui dérivent d'un adénocarcinome colique (figure 29). Bien qu'extrêmement spécifique, nous ne pouvons cependant exclure que le marquage concerne une protéine reconnue par l'anticorps et présentant des épitopes communs à PPARy. Des résultats similaires ont été obtenus concernant la localisation cytoplasmique de PPARyau niveau de tumeurs du poumon [330]. Avec l'anticorps monoclonal provenant de la société Santa Cruz (USA), les résultats obtenus en immunohistochimie indiquent un signal positif pour PPARy au niveau nucléaire et cytoplasmique dans 11 % des tumeurs NSCLC examinées, mais 82% des tumeurs étudiés indiquent un signal uniquement cytoplasmique et enfin seulement 7% des tumeurs présentent une localisation exclusivement nucléaire de PPARy. Chang et Szabo [39] ont également étudié l'expression de PPARy dans ce type de tumeur. Leurs résultats indiquent que PPARyest exprimé dans 48,7% des cas étudiés (39 cas), considérant le signal positif comme étant uniquement nucléaire. La localisation cytoplasmique de PPARy est considérée comme un signal non spécifique. Enfin, Han et al. [119] ont montré que PPARy est aussi retrouvé au niveau nucléaire et cytoplasmique dans les cellules de neuroblastomes. Le marquage cytoplasmique est d'autre part granulaire et pourrait correspondre à un marquage de type mitochondrial. Cette hypothèse a déjà été évoquée pour expliquer le 98
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VI. INTERVENTION DES PPAR DANS LA D
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MATERIELS ET METHODES 1. MODELES BI
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les cellules Caco-2 sont lysées en
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