Ce document numérisé est le fruit d'un long travail approuvé par le ...
Ce document numérisé est le fruit d'un long travail approuvé par le ...
Ce document numérisé est le fruit d'un long travail approuvé par le ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
EXPRESSION DES PPAR AU NIVEAU<br />
D'ADENOCARCINOMES COLIQUES HUMAINS<br />
1. EXPRESSION DES PROTEINES DES PPAR AU NIVEAU<br />
D'ADENOCARCINOMES COLIQUES HUMAINS<br />
a. Difficultés rencontrées<br />
L'analyse de l'expression des protéines PPAR au niveau des adénocarcinomes<br />
coliques a été essentiel<strong>le</strong>ment abordée <strong>par</strong> immunohistochimie ainsi que cel<strong>le</strong> d'autres<br />
marqueurs moléculaires comme COX-2, COX-1 (exprimés dans <strong>le</strong>s cellu<strong>le</strong>s tumora<strong>le</strong>s<br />
coliques), la cytokératine 18 (marqueur de la différenciation cellulaire) et la protéine Ki 67<br />
(marqueur de la prolifération cellulaire).<br />
Initia<strong>le</strong>ment, notre <strong>travail</strong> devait reposer exclusivement sur l'utilisation des antiséra<br />
produits au laboratoire dirigés contre <strong>le</strong>s différents PPAR. <strong>Ce</strong>s anticorps ont été caractérisés<br />
et utilisés avec succès pour étudier l'expression des PPAR dans <strong>le</strong> tractus dig<strong>est</strong>if du fœtus<br />
humain et dans <strong>le</strong>s cellu<strong>le</strong>s Caco-2 et HT29 cultivées jusqu'à 15 jours de culture [139, 140].<br />
Les conditions des techniques immunohistochimiques appliquées aux cellu<strong>le</strong>s Caco-2<br />
(figure 29) n'ont pas pu être utilisées avec succès pour <strong>le</strong>s coupes d'adénocarcinomes<br />
coliques humains. Les différents antiséra n'ont donné aucun marquage satisfaisant en<br />
immunocytochimie avec <strong>le</strong>s coupes de tissus; <strong>le</strong> bruit de fond était trop important et un<br />
accrochage non spécifique persistait au niveau du mucus.<br />
Nous avons <strong>par</strong> conséquent t<strong>est</strong>é différentes pré<strong>par</strong>ations commercia<strong>le</strong>s d'anticorps,<br />
dirigés contre <strong>le</strong>s PPAR :<br />
- L'antisérum anti-PPARy provenant de la société SantaCruz (USA) ne donne aucun<br />
résultat satisfaisant en immunocytochimie quel que soit <strong>le</strong> t<strong>est</strong> effectué avec des coupes<br />
dé<strong>par</strong>affinées de cellu<strong>le</strong>s Caco-2 et d'adénocarcinomes coliques.<br />
- Les antiséra anti-PPARa, ~ et y provenant de la société AB Reagent ont été utilisés avec<br />
succès sur des pré<strong>par</strong>ations de cellu<strong>le</strong>s HT29 et Caco-2 ainsi que sur des coupes de tissus.<br />
<strong>Ce</strong>pendant, avec <strong>le</strong>s coupes histologiques, <strong>le</strong> marquage obtenu avec <strong>le</strong>s anticorps anti<br />
PPARa et ~ <strong>est</strong> faib<strong>le</strong> et diffus et l'interprétation des résultats <strong>est</strong> délicate. A l'opposé, pour<br />
<strong>le</strong>s cellu<strong>le</strong>s cultivées in vitro et des coupes de biopsies, <strong>le</strong> marquage avec l'anticorps anti<br />
PPARy <strong>est</strong> suffisant pour permettre une bonne interprétation des résultats.<br />
92
Change language