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Expression des récepteurs activés par les proliférateurs de peroxysomes (PPAR) au niveau du colon sain et tumoral Liste des abréviations................................................................................... 2 Avant.propos......................................... 4 ~~'jj'~©[Q)[UJ~'jj'~©~ ~~~[!J©@M~[)=D~@[UJ~............................................................ 6 CARACTERES GENERAUX SUR LE COLON FŒTAL ET LE COLON ADULTE SAIN 1. LE TRACTUS DIGESTIF FŒTAL HUMAIN 7 a. Principaux stades de développement du tractus digestif fœtal humain..... 7 b. Développement morphologique et fonctionnel de l'épithélium intestinal fœtal humain... 8 Il. LE COLON HUMAIN........................................................................................ 9 a. Anatomie du gros intestin................................................................................. 9 b. L'épithélium du colon...................................................................................... 9 c. Prolifération et différenciation des cellules du colon adulte...................................... 11 III. REGULATION DU DEVELOPPEMENT ET DE LA DIFFERENCIATION DE L'EPITHELIUM INTESTINAL..................................................................................................... 11 a. La voie de transduction Wnt/Wingless................................................................ 12 Mécanisme de transduction. .................. ..................... ..................... ............ ..... 12 Gènes suppresseurs de tumeurs........................................................................ 13 Gènes cibles....................................................................... 14 b. Facteurs transcriptionnels intervenant dans le développement et la différenciation de l'épithélium 16 LES RECEPTEURS ACTIVES PAR LES PROLIFERATEURS DEPEROXYSOMES:LESPPAR 1. STRUCTURE DES PPAR 18 Il. LES DIFFERENTS ISOTYPES DE PPAR............................................................... 19 III. DISTRIBUTION TISSULAIRE DES PPAR........ 20 IV. MODE D'ACTION DES PPAR...................... 20 a. Formation d'hétérodimères.............................................................................. 20 b. Les activateurs des PPAR......................... 22 c. Phosphorylation et déphosphorylation. ........................ ... ...... .............................. 23 V. INTERVENTION DES PPAR DANS LE METABOLISME LIPIDIQUE 24 a. Métabolisme des acides gras........................................................................... 24 b. Différenciation adipocytaire.............................................................................. 26 VI. INTERVENTION DES PPAR DANS LA DIFFERENCIATION D'AUTRES TYPES CELLULAIRES................................................................................................... 26 VII. ROLES DES PPAR DANS L'INFLAMMATION TiSSULAIRE....................................... 26
VIII. ROLES DES PPAR DANS CERTAINES PATHOLOGIES.......................................... 27 a. PPAR et athérosclérose. 27 b. PPAR et hépatocancérogenèse '" 29 c. PPAR et autres processus néoplasiques.... 30 CANCERS DU COLON ETPPAR 1. LES CANCERS DU COLON................................................................................. 32 a. Données générales.. 32 b. Incidence et caractères épidémiologiques des cancers colorectaux......................... 32 c. Histologie du cancer du colon............. 33 Les adénomes colorectaux 33 Les carcinomes colorectaux.. .. ......... ............ .............................. ............... ...... 34 d. Classification des cancers colorectaux............................................................... 36 e. La séquence polype adénomateuxladénocarcinome.......... 39 f. Les altérations génétiques au cours des cancers colorectaux.................................. 40 Il. IMPLICATION DES PPAR DANS LE CANCER COLORECTAL.................................... 42 (Q)~J~~m[f~[Q)[U) IrM%7ffi\~[L 46 [R.\\lffi\1r~~~~[L~ ~Ir [R.\\l~Ir[H](Q)[Q)~~. ...... .... .. .... .. ... . .. .. . ... . .. . .. . .. . .. . ... ... ... .. ... . .... . ... . .. . . .. 48 1. MODELES BIOLOGIQUES.......................................................................................... 49 a. Lignées cellulaires.......................................................................................... 49 b. Tissus humains............................................................................................. 50 Intestins fœtaux............................................................................................. 50 Adénocarcinomes colorectaux. ... ..................... ..................... ............................ 50 c. Tissus de rats................................................................................................ 50 Obtention des tissus..... " ............ ...... ... ......... ... ...................................... ......... 50 Isolement fractionné des entérocytes le long de l'axe crypto-vil/ositaire..................... 50 Il.TECHNIQUES BIOCHIMIQUES..................................................................................... 51 a. Dosage des protéines.... 51 Extraction protéique....................................................................................... 51 Dosage protéique. ...... ... ... ...... ... ......... ............... ......... ............ ...... ................. 51 b. Dosages enzymatiques................. 52 Préparation des homogénats cellulaires..... .. ...... ............ .................. ............... ... 52 Dosage de l'activité de la phosphatase alcaline............................................... .... 52 Dosage de l'activité de la saccharase/isomaltase................................................. 52 Dosage de l'activité de la catalase..................................................................... 52 Dosage de l'activité de l'acyl GoA-oxydase......................................................... 53 c. Production des anticorps polyclonaux anti-PPAR...... 53 d. Technique d'immunoréplique (Western blotting)............................. 54 Electrophorèse......................................................................................... 54 Transfert sur membrane PVDF......................................................................... 54 Détection immunologique................................................................ 54 III. TECHNIQUES HiSTOLOGIQUES................................................................................ 55 a. Immunocytochimie.......................................................................................... 55 Immunocytochimie sur coupes de tissus congelés du tractus digestif fœtal humain..... 55 Immunocytochimie des cellules Gaco-2.............................................................. 56 • Immunocytochimie sur coupes en paraffine des cellules Caco-2
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