Cuvânt Înainte Imunologia este unul dintre ... - Cursuri Medicina

CMH. Hibridoamele de şobolan, obţinute prin fuziunea limfocitelor splenice cu celule demielom, sunt mai stabile şi anticorpii pe care îi sintetizeazã fixeazã complementul.Cantitatea de antigen necesarã pentru imunizare depinde de imunogenitatea acestuia. Antigenelecelulare bacteriene sau ale celulei eucariote sunt foarte imunogene. Antigenele solubile(polipeptide, glucide, hormoni) sunt slab antigenice. Imunogenitatea lor creşte dupã cuplarea cuhemocianinã de Limulus (KLH) sau cu albumina. Cea mai bunã imunizare se obţine prininjectare intravenoasã sau intraperitonealã repetatã, timp de câteva sãptãmâni sau luni, aantigenului slab imunogen.Splina se recolteazã înainte de atingerea titrului maxim al anticorpilor serici. Blastele fuzioneazãmai uşor decât celulele în repaus.O alternativã a imunizãrii este stimularea limfocitelor in vitro, prin incubarea în prezenţaantigenului.3. Fuziunea se realizeazã în scopul imortalizãriiî celulelor producãtoare de anticorpi şi esteesenţa biotehnologiei hibridomului. Scopul imortalizãriiîeste pãstrarea capacitãţii limfocitelorindividuale de a secreta un singur tip de AMC, prin creşterea nelimitatã în timp, fãrã senescenţã,in vivo sau in vitro, ca o consecinţã a transformãrii, indusã cu celule de mielom.Limfocitele sau imortalizat pe trei cãi:- prin fuziune cu celule tumorale de mielom- prin infecţie cu un virus transformant ADN- prin transfecţie cu ADN transformant din celulele maligne sau cu ADN al unui oncodnavirus.Cea mai utilizatã metodã de imortalizareî este aceea a fuziunii cu o celulã de mielom. Fuziunealimfocitelor viabile din splinã, obţinute prin dezagregare mecanicã, cu celulele de mielomHGPRT- se realizeazã prin amestecul lor în proporţie de 2-5 celule splenice/o celulã de mielom.