Cuvânt Înainte Imunologia este unul dintre ... - Cursuri Medicina

Iniţial, vaccinurile s-au obţinut din preparatele brute de virus, dupã multiplicarea lor într-un ţesut(in vivo) sau în culturi celulare. Pe mãsurã ce a fost posibilã obţinerea unor titruri înalte de virus,în scopul diminuãrii toxicitãţii vaccinului, s-a trecut la purificarea virusului şi a unor componentevirale.Vaccinurile subunitare conţin proteine virale în care se gãsesc localizate situsuri antigenicemajore şi care se pot substitui virionilor în practica vaccinãrii. De exemplu, pentru virusulinfluenza, vaccinul subunitar conţine antigenele de suprafaţã HA şi NA. Preparatul este mai puţintoxic decât virusul integral inactivat, dar este mai puţin eficient în stimularea rãspunsului imun.Celulele mamaliene reprezintã un sistem optim pentru producerea proteinelor virale, utilizabileca vaccinuri subunitare. Celulele în culturã se infecteazã cu virus şi din lizatele celulare sepurificã antigene proteice. În lizate se gãseşte o cantitate mare de proteine virale în exces,neîncorporate în virioni.Obţinerea vaccinurilor subunitare proteice, în culturile de celule animale ridicã probleme dificilede purificare a proteinelor virale, din amestecul cu proteinele celulare. Dacã se folosesc liniicelulare continue, trebuie îndepãrtat ADN celular, potenţial oncogen.Tehnici moderne de obţinere a vaccinurilor subunitareDezvoltarea biologiei moleculare şi cunoaşterea mecanismelor rãspunsului imun, a stimulatpreocupãrile privind obţinerea unor vaccinuri noi. Utilizarea anticorpilor monoclonali a fãcutposibilã identificarea epitopior cu rol esenţial în stimularea rãspunsului imun, iar genelecodificatoare ale antigenelor, au fost clonate prin tehnicile de inginerie genicã.Genele codificatoare ale antigenelor protectoare, se pot izola dupã fragmentarea genomului subacţiunea cataliticã a enzimelor de restricţie. Prin tehnologia ADN recombinant, genele se inserãîn celula procariotã (E. coli,B. subtilis), sau în celulele eucariote (levuri, celule mamaliene).Fragmentarea genomului cu endonucleaze de restricţie este posibilã numai pentrudezoxiribovirusuri. Genomul ARN trebuie mai întâi transcris în ADNc şi ulterior poate fi utilizat