Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

2 - Essais d'infection expérimentale croisée en conditions axéniques
Des essais d'infection expérimentale sur larves axéniques d'a. edulis et de C. gigas ont
été entrepris afin de déterminer une éventuelle transmission du (des) virus de type herpès entre
ces deux espèces d'huîtres.
En effet, des mortalités importantes de larves d'a. edulis élevées en écloserie ont pu
être observées de façon concomitante avec des mortalités de larves de C. gigas au cours de
l'été 1991. Toutefois, si ces mortalités ont pu être associées, dans le cas des larves de C. gigas,
à la détection de particules virales de type herpès, l'étiologie des mortalités observées chez les
larves d'a. edulis n'a pas été clairement établie dans ce cas (M. Comps et N. Cochennec,
communication personnelle).
Toutefois, la présence de particules virales de type herpès a pu être associée
ultérieurement à d'importantes mortalités de larves d'a. edulis, produites en 1994 en
écloseries. Par ailleurs, un virus similaire a été décrit une première fois chez des naissains d'a.
edulis issus d'écloserie, âgés de cinq mois, et présentant des mortalités de 90% (Comps et
Cochennec, 1993). Cette observation a été ultérieurement confirmée par des analyses,
effectuées au laboratoire de La Tremblade, lors d'épisodes de mortalités.
L'ensemble de ces observations, laissant suspecter la transmission du virus de type
herpès entre ces deux espèces d'huître, a conduit à réaliser des essais d'infection expérimentale
croisée de larves axéniques d'a. edulis et de C. gigas.
2.1 - Infection de larves axéniques d'Ostrea edulis par des larves de Crassostrea gigas
vi rosées
La biologie d'a. edulis ne permet pas de réaliser une fécondation in vitro. Chez cette
espèce, les spermatozoïdes pondus dans l'eau par les huîtres mâles viennent féconder les
ovules encore présents dans la gonade des huîtres femelles. Ces dernières "pondent" des larves
nageuses de 100 Ilm sept jours plus tard (Barnabé, 1986).
Ainsi pour réaliser les élevages axéniques de larves d'O. edulis, les larves sont
récoltées par tamisage sept jours après la fécondation. Ces larves sont lavées avec de l'eau de
mer stérile puis décontaminées par un bain d'antibiotiques de 20 minutes (Publication 5). Les
larves sont ensuite mises en élevage en conditions stériles.
Les récipients d'élevage contenant les larves axéniques d'a. edulis reçoivent alors des
broyats ultra filtrés de larves de C. gigas virosées, comme décrit précédemment.
Dans les récipients d'élevage inoculés avec des broyats uItrafiItrés de larves de C.
gigas vi rosées, 80% des larves ont sédimenté 10 à 12 jours post-infection. Dans les mêmes
conditions, 50% des larves ont sédimenté dans les élevages témoins. Aucune lésion ni
infection virale n'ont pu être décelées par l'observation de ces échantillons en microscopie
électronique.
Ce résultat ne permet toutefois pas de conclure quant à la transmissibilité ou non du
virus des larves de C. gigas aux larves d'a. edulis. Ce résultat peut être interprété de façon
différente. En effet, comme il sera montré plus loin, la reproduction de l'infection sur des
larves de C. gigas en conditions non axéniques ne semble pouvoir être réalisée que dans des
conditions très particulières. De plus, il est possible de supposer que la méthode de
décontamination des larves d'a. edulis n'est pas suffisante et que ces larves ne sont pas
réellement axéniques.
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