Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

Chapitre VI : Mise au point de méthodes de diagnostic du virus
Publication 9 : Antibodies specific for Channel Catfish Virus cross-react with Pacific
oyster, Crassos/rea gigas, herpes-Iike virus.
Veterinary Research
Les méthodes mises en oeuvre pour le diagnostic d'infections virales chez les
mollusques bivalves sont actuellement limitées à l'observation de lésions histologiques. Dans
le cas du virus de type herpès de C. gigas, ces lésions sont particulières, mais nécessitent
néanmoins d'être précisées par une analyse en microscopie électronique des échantillons
suspects. Ces méthodes ne sont cependant pas adaptées à l'analyse d'un très grand nombre
d'individus alors qu'un diagnostic précis et rapide constitue le premier moyen de lutte contre
la dissémination de la maladie.
Le dépistage de l'infection peut être envisagé à deux niveaux:
- lorsque le virus est en phase de multiplication active, dans les lots d'animaux
présentant des symptômes de mortalité ;
- lorsque le virus est présent sous une forme latente ou dans une phase de
multiplication peu productive, chez les individus porteurs asymptomatiques.
Les méthodes de diagnostic indirect basées sur la recherche d'anticorps spécifiques
dirigés contre le virus (de Kinkelin el al., 1985) dans l'hémolymphe des animaux virosés ne
peuvent pas être envisagées dans le cas de C. gigas. En effet, les mollusques bivalves ont un
système immunitaire relativement "primitif", dans iequel ne sont pas représentées les cellules
de type lymphocytaire et les molécules de type immunoglobuline.
Le diagnostic direct du virus, par recherche de ses éventuels effets cytopathogènes sur
des tapis de cellules en culture (de Kinkelin el al., 1985) n'est pas réalisable actuellement, en
l'absence de lignées cellulaires de mollusques bivalves. Des essais ont toutefois été réalisés
par inoculation de broyats d'animaux virosés à des tapis de cellules issues de lignées de
poissons et d'insectes ou de primo cultures de tissus de C. gigas (Chapitre IV). Ces essais ont
permis d'obtenir un effet cytopathogène spécifique sur la lignée cellulaire de poisson BF2,
mais en l'absence de démonstration d'une infection virale réelle de ces cellules, cette méthode
n'a pas pu être retenue pour le diagnostic du virus de type herpès de C. gigas.
Les autres méthodes de diagnostic direct pouvant être adaptées à C. gigas sont basées
sur la recherche de l'agent pathogène à l'aide de réactifs spécifiques, utilisés dans des
méthodes immunologiques ou de biologie moléculaire. Ces réactifs spécifiques peuvent être
obtenus par différentes voies, selon la disponibilité ou non de virus purifié.
De cette façon, les essais décrits dans ce chapitre ont été réalisés dans un premier
temps à partir de réactifs préexistants, spécifiques d'autres virus apparentés aux herpès. Puis,
la préparation de réactifs spécifiques a été tentée à partir d'échantillons non purifiés (larves et
naissains de C. gigas vi rosés ). Enfin, la purification des particules virales ayant pu être
réalisée à la fin de ce travail, à partir de larves de C. gigas infectées, la préparation de réactifs
spécifiques à partir de virus purifié et la mise au point de méthodes de diagnostic ont été
initiés.
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