Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

Dans un deuxième temps, après avoir apparenté ce virus de dorades à la famille des
Iridoviridae et au genre des Lymphocystivirus, en fonction des symptômes de la maladie et de
la structure du virion, les techniques d'immunomarquage ont été appliquées à ces échantillons.
Les anticorps monoclonaux et polyclonaux spécifiques du LDV (souche Leetown NFH) ont
ainsi été testés sur des coupes de dorades virosées, fixées par le liquide de Bouin. Ces essais
ont été réalisés dans l'objectif de démontrer d'éventuelles réactions croisées avec ces
anticorps et de confirmer l'appartenance de ce virus aux Lymphocystivirus.
Sept des dix anticorps monoclonaux et les anticorps polyclonaux donnent lieu à un
marquage sur ces coupes de dorades vi rosées : les anticorps N°l, 2,4,6,7,8 et 9. Ces réactifs
donnent lieu à un marquage au niveau des kystes et, de façon moins intense, dans le
cytoplasme de cellules du derme se trouvant à proximité des kystes (Figure 1).
Dans un deuxième temps, les anticorps N°2 et N°6, présentant la plus forte réactivité
sur les cellules du derme, ont été testés sur différents organes de dorades virosées, fixés par le
liquide de Bouin. Ces essais ont montré une absence de marquage des cellules des tubules
rénaux, confirmant ainsi l'hypothèse que la dégénérescence de ces cellules est un effet indirect
de l'infection virale et qu'elles ne sont pas elles même infectées par le LDV. De plus, un
marquage sous forme de ponctuations cytoplasmiques a pu être observé dans certaines
cellules du tissu interstitiel des reins. Un marquage similaire a pu être également observé au
niveau de quelques cellules du pancréas et de la muqueuse digestive, suggérant une infection
par le LDV. Au contraire, le foie et les branchies de dorades ne présentent pas de marquage
pouvant refléter une infection virale (résultats non montrés).
Les virus du genre Lymphocystis sont caractérisés par la présence de kystes, également
appelés nodules ou pseudotumeurs, qui sont localisés essentiellement sur le derme des
poissons et, de façon beaucoup plus rare sur les organes internes et les branchies (Flügel,
1985). Les résultats obtenus avec les anticorps spécifiques du LDV sont en accord avec ces
observations. En effet, les anticorps ont montré une réactivité importante sur les kystes. Par
ailleurs, une réaction a également permis de dépister une infection virale relativement précoce
sur certains organes internes, en l'absence de kystes.
Ainsi, l'application de cette technique d'immunomarquage au diagnostic du LDV chez
les poissons devrait permettre non seulement de localiser plus précisément les foyers
d'infection par le LDV à l'échelle de l'animal, ainsi que les types cellulaires affectés, mais
aussi de détecter plus précocement cette virose, bien avant l'apparition de kystes. De cette
façon, en réalisant un suivi épidémiologique des élevages, le diagnostic précoce de cette
virose pourrait être réalisé. Ce qui permettrait alors la mise en place rapide de mesures
prophylactiques, telles que le traitement non spécifique des poissons par la vitamine C (lC.
Raymond, communication personnelle), l'isolement ou la destruction des lots contaminés dans
un élevage. Ainsi, la dissémination de la maladie au sein d'un élevage ou lors du transfert
d'animaux, pourrait être limitée.
La mise au point d'un diagnostic fiable et précoce de l'infection par le LDV présente
un intérêt particulier dans le cas des poissons d'élevage. En effet, bien que cette virose ne soit
pas habituellement responsable de pertes importantes chez les poissons de grande taille, les
juvéniles y sont plus sensibles et peuvent présenter un important retard de croissance. De plus,
lorsque les poissons infectés par le LDV subissent un stress supplémentaire, tel qu'une forte
densité d'élevage, de mauvaises conditions climatiques (Le Deuff et Renault, 1993) ou une
surinfection bactérienne (Ahne et al., 1991), des mortalités importantes peuvent être
observées. Des pertes importantes peuvent également résulter du comportement cannibale des
45