Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

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References AllIle . w .. SchlOl fc ldt . H.-J .• and Ogawa. M .. ( 199 1). Iritlov irus infection or adult shealfish (Si/unIJ g/u//ùl. BIII/. EII/'. Ass. Fish Pmlwl.. 11(3): 97-98. Oa surco. B .. Marcolegui. M.A .. Rueda, A, Tiana. A. Castellanos. A .. Tarazona. J.V,. Muiioz, M,J . and Coll. J.M .. (1990). First report or Lymphocyst is disease În Span/.{ al//,ota (Linnaeus) in Spain. Bull. El//'. A.H. Fi.rh PmllOl .. 10(3): 7 1-73. Langdol1, J.S .. Humphrey J.O., and Williams. L.M .. ( 19R8). OUlbreaks of an EHNV-like iridovirus in cuhured rainbow trout. Salmo gairdllell Ri chardson. in Australia. J. Fish Dis .. Il: 93 -96. Masocro. L. Ercolini. c.. Caggiano. M. and Rosso. A.. (1986). Osservazioni preliminari sulla limfocisti in una maricoltura inlensiva italiana Ri". Il. Piscic. IlIiop .. 2: 70-74. Menezes. 1.. Ramas. A. and Pereira. T G. (1987) LymphocyslÎ s disease: an outbreak in Sparus li/mUa from Ria Fonnosa. south coast or Portugal. Aql/(j("/dlllrr. 67: 222-225. 44 Bull. Eur. Ass. Fish Pathol., 13(4),133, 1993. Manie. R.M., Harris. J.E. îlnd McMaholl, S .. (1992) Lymphocyslis infections in culturcd gilt-head sea bream (Sparlls al/rata) in the Aegean sea. Bull. EIII". AH. Fi,rh Pl1Ihol .. 12(4) : 134- 136 Papema. 1.. Sabnai. 1. and Colomi A.. (1982). An oUlbreak of Iymphocystis in S,Janls allrata L in Ihe gulf of Aqaba. Red sca. J. Fish Dis .. 5: 433-437 Pinlo R. M .• Alvarez-Pel/ilero. P .• Bosch. A. and Jarre J .. (1989). Occurcncc or a viral erylhocytic infection in Ihe Medilcrrancan sea bass, Diall/rarchlls labrox(L). J. Fish Dis .• 12 ; 185- 19 1 Sa malccos C. P .• ( 1986). Analysis of Ihe struclure or fish Lymphocysti s disease virions from sk in lu mours of PleurOl/ecles. Arc"" Virol .• 91 : 1- 10. Walker. and Weissc nbcrg R. (1965). Confonnity of light and eleclron microscopy studies on viru s partide distribution in Lymphocysti s tumour ce lls of fish. AIIII. N. Y. Acad. Sei .• 126 : 375-385
Dans un deuxième temps, après avoir apparenté ce virus de dorades à la famille des Iridoviridae et au genre des Lymphocystivirus, en fonction des symptômes de la maladie et de la structure du virion, les techniques d'immunomarquage ont été appliquées à ces échantillons. Les anticorps monoclonaux et polyclonaux spécifiques du LDV (souche Leetown NFH) ont ainsi été testés sur des coupes de dorades virosées, fixées par le liquide de Bouin. Ces essais ont été réalisés dans l'objectif de démontrer d'éventuelles réactions croisées avec ces anticorps et de confirmer l'appartenance de ce virus aux Lymphocystivirus. Sept des dix anticorps monoclonaux et les anticorps polyclonaux donnent lieu à un marquage sur ces coupes de dorades vi rosées : les anticorps N°l, 2,4,6,7,8 et 9. Ces réactifs donnent lieu à un marquage au niveau des kystes et, de façon moins intense, dans le cytoplasme de cellules du derme se trouvant à proximité des kystes (Figure 1). Dans un deuxième temps, les anticorps N°2 et N°6, présentant la plus forte réactivité sur les cellules du derme, ont été testés sur différents organes de dorades virosées, fixés par le liquide de Bouin. Ces essais ont montré une absence de marquage des cellules des tubules rénaux, confirmant ainsi l'hypothèse que la dégénérescence de ces cellules est un effet indirect de l'infection virale et qu'elles ne sont pas elles même infectées par le LDV. De plus, un marquage sous forme de ponctuations cytoplasmiques a pu être observé dans certaines cellules du tissu interstitiel des reins. Un marquage similaire a pu être également observé au niveau de quelques cellules du pancréas et de la muqueuse digestive, suggérant une infection par le LDV. Au contraire, le foie et les branchies de dorades ne présentent pas de marquage pouvant refléter une infection virale (résultats non montrés). Les virus du genre Lymphocystis sont caractérisés par la présence de kystes, également appelés nodules ou pseudotumeurs, qui sont localisés essentiellement sur le derme des poissons et, de façon beaucoup plus rare sur les organes internes et les branchies (Flügel, 1985). Les résultats obtenus avec les anticorps spécifiques du LDV sont en accord avec ces observations. En effet, les anticorps ont montré une réactivité importante sur les kystes. Par ailleurs, une réaction a également permis de dépister une infection virale relativement précoce sur certains organes internes, en l'absence de kystes. Ainsi, l'application de cette technique d'immunomarquage au diagnostic du LDV chez les poissons devrait permettre non seulement de localiser plus précisément les foyers d'infection par le LDV à l'échelle de l'animal, ainsi que les types cellulaires affectés, mais aussi de détecter plus précocement cette virose, bien avant l'apparition de kystes. De cette façon, en réalisant un suivi épidémiologique des élevages, le diagnostic précoce de cette virose pourrait être réalisé. Ce qui permettrait alors la mise en place rapide de mesures prophylactiques, telles que le traitement non spécifique des poissons par la vitamine C (lC. Raymond, communication personnelle), l'isolement ou la destruction des lots contaminés dans un élevage. Ainsi, la dissémination de la maladie au sein d'un élevage ou lors du transfert d'animaux, pourrait être limitée. La mise au point d'un diagnostic fiable et précoce de l'infection par le LDV présente un intérêt particulier dans le cas des poissons d'élevage. En effet, bien que cette virose ne soit pas habituellement responsable de pertes importantes chez les poissons de grande taille, les juvéniles y sont plus sensibles et peuvent présenter un important retard de croissance. De plus, lorsque les poissons infectés par le LDV subissent un stress supplémentaire, tel qu'une forte densité d'élevage, de mauvaises conditions climatiques (Le Deuff et Renault, 1993) ou une surinfection bactérienne (Ahne et al., 1991), des mortalités importantes peuvent être observées. Des pertes importantes peuvent également résulter du comportement cannibale des 45
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Cahour A., 1979. Mar/eilia refringe
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Darlington R.W. et Moss L.H., 1969.
Page 185 and 186:
Girard M. et Hirth L., 1989b. Méth
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Johnson D.C. et Spear P.G., 1982. M
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Lemaster S. et Roizman B., 1980. He
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Ohba M., Kanda K. et Aizawa K., 199
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Read G.S. et Frenkel N., 1978. Herp
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Shuster C.L. et Hillman T.E., 1963.
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