Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

Chapitre 1 : Caractérisation d'un virus apparenté aux Lymphocystis
chez la dorade royale, Sparus aurata
Publication 2 : Lympllocystis outbreaks in farmed sea bream, Spartls aurata, tirst report
on French Mediterranean coasts.
Bulletin of the European Association of Fish Pathologists
Des échantillons de dorades royales, Sparus aurata, présentant les symptômes
caractéristiques de l'infection par un virus de type Lymphocystis, ont pu être régulièrement
obtenus auprès de plusieurs éleveurs français. La description des lésions histologiques
associées à cette pathologie a été réalisée. L'observation de ces échantillons en microscopie
électronique, a par la suite permis de confirmer l'identification de l'agent responsable de cette
maladie. La caractérisation électrophorétique de cet agent a été réalisée à partir de particules
virales purifiées. Enfin, grâce aux anticorps monoclonaux et polyclonaux disponibles au
laboratoire, une caractérisation antigénique du virus, sur tissus fixés, a été réalisée.
1 - Caractérisation de l'infection par le Lymphocystis Disease Virus sur tissus
fixés
La description des lésions observées lors d'une infection à Lymphocystivirus est la
première étape de ce travail. En effet, ces résultats permettront de comparer ultérieurement la
détection des effets cytopathogènes, visualisés en histologie classique, avec la détection
antigénique sur coupes. Selon les résultats, l'application de cette dernière méthode, pour le
diagnostic de cette virose, pourra être envisagée.
Des dorades royales, Sparus aurata, présentant une infection aiguë ont été obtenues
auprès de différents éleveurs français, sur les côtes méditerranéenne et atlantique.
Plusieurs niveaux lésionnels ont été observés sur ces poissons : les lésions
macroscopiques sont les kystes qui constituent un stade avancé de l'infection (Publication 2 :
Figure 1). Des lésions, signes d'une infection plus récente, peuvent être observées en
histologie. Ces altérations, localisées au niveau de cellules de la peau, sont caractérisées par
des noyaux à chromatine rejetée en périphérie, ainsi que par des inclusions basophiles dans le
cytoplasme des fibroblastes du derme (Publication 2 : Figure 2a). L'observation des différents
organes révèle, au niveau des reins, des anomalies de même type (noyaux anormaux et
inclusions cytoplasmiques). Ces altérations sont observées dans les fibroblastes du tissu
interstitiel, alors que les cellules des tubules rénaux ne présentent que des altérations
nucléaires. La coloration de Feulgen et Rossenbeck (Annexe 2) a été utilisée pour montrer la
nature des inclusions cytoplasmiques. La coloration rouge à rose de ces inclusions confirme
qu'il s'agit d'ADN (Publication 2 : Figure 3), elles résultent de l'accumulation de virus dans le
cytoplasme.
L'absence d'inclusions basophiles dans le cytoplasme des cellules rénales semble
indiquer que les anomalies nucléaires observées dans ce cas, résultent d'une souffrance des
cellules et du mauvais état général des poissons plutôt que d'une infection de ces cellules par
le LDV. En effet, ces dorades présentaient un stade avancé d'infection et les nombreuses
lésions externes (Publication 2 : Figure 1) pourraient avoir perturbé l'osmorégulation des
poissons, ce qui se traduirait par des lésions au niveau des cellules rénales. Par ailleurs, il a été
montré que les protéines d'un autre virus apparenté aux Iridoviridae, le Chilo Iridescent Virus
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