Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

séquences disponibles dans les banques de données. Des réactifs homologues ont également
été préparés, d'une part, par immunisation d'animaux de laboratoire avec des broyats totaux de
larves de C. gigas vi rosées, d'autre part par clonage de l'ADN total extrait d'huîtres virosées.
Ces travaux n'ont pas permis une application diagnostique des réactifs testés. Toutefois, des
réactions croisées ont pu être visualisées à l'aide d'anticorps spécifiques du Channel Catfish
Virus (herpèsvirus du poisson chat) et le virus de type herpès de C. gigas. Si la sensibilité
obtenue ne permet pas d'envisager une application diagnostique, ces résultats présentent un
intérêt taxonomique.
Enfin, malgré les difficultés d'approvisionnement en matériel virosé, un protocole
reproductible, permettant la purification du virus à partir de larves de C. gigas infectées, a pu
être mis au point. De cette façon, les quantités de virions nécessaire à l'immunisation
d'animaux de laboratoire ont été préparées. Les anticorps polyclonaux obtenus ont montré une
bonne spécificité. La sensibilité de ces réactifs en immunohistochimie permet de plus,
d'envisager leur utilisation pour le diagnostic de virus de type herpès chez les larves et le
naissain de C. gigas.
La disponibilité de particules virales purifiées à la fin de ce travail de thèse a permis de
réaliser l'extraction des acides nucléiques associés aux virions et de préciser la nature de leur
génome. Les particules virales contiennent un génome de type ADN double brin, dont la taille
a été estimée à 180 kpb. Ces résultats sont en accord avec les données disponibles pour
d'autres virus de la famille des Herpesviridae, dont le génome est de même nature et a une
taille comprise entre 120 et 220 kpb. Le clonage de fragments de ce génome a été réalisé. Ces
fragments ont été utilisés comme sondes, dans des essais préliminaires de mise au point de
réactifs utilisables à des fins diagnostiques en dot blot, PCR et hybridation in situ.
En conclusion, il faut rappeler le caractère pionnier de ce travail. De ce fait, la mise en
place préalable de certains outils nécessaires à l'étude de ce virus a été réalisée. Puis,
différents axes de recherche ont été explorés. Dans son ensemble, ce travail représente une
contribution à l'étude des virus de mollusques marins, non seulement par les résultats obtenus,
mais aussi par les perspectives de recherche fondamentale et appliquée qui lui sont associées.
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