Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

2 - Participation à la mise en évidence d'un virus de type herpès chez le
naissain de Crassostrea gigas
A partir de 1993, des épisodes de mortalités importantes (50-100%) ont affecté de
façon sporadique les productions de naissains de C. gigas issus d'écloserie. L'analyse en
histologie et en microscopie électronique à transmission de ces lots de naissains, a permis de
mettre en évidence un virus similaire à celui décrit chez les larves.
Les mOltalités de juvéniles de C. gigas, associées à la présence de virus de type herpès,
se produisent généralement de façon très soudaine. Ainsi, 50 à 100% de mortalité peuvent être
atteints en l'espace d'une semaine ou moins. Puis, après un court épisode de mortalités au sein
d'un lot, les animaux survivants semblent reprendre leur croissance normalement.
De plus, il semble que l'infection virale chez les juvéniles se propage difficilement en
milieu ouvert. En effet, lors des mortalités de 1993, la présence de virus de type herpès a été
décrite chez cinq lots de naissains de C. gigas présentant des mortalités. Dans le même temps,
aucune mortalité n'a pu être décelée parmi les animaux juvéniles situés à proximité de ces lots
présentant une infection aiguë. Enfin, les naissains survivants ont été contrôlés après une
période de cinq mois, par des analyses en histologie et le calcul des taux de mortalités.
Aucune anomalie n'a pu être décelée chez ces animaux.
Les échantillons de naissains de C. gigas, présentant des mortalités anormales ont été
fixés, pour l'analyse en histologie, dans le liquide de Davidson. Après déshydratation,
imprégnation et inclusion des tissus en paraffine, des coupes de deux à trois micromètres ont
été réalisées et colorées à l'hé mal un-éosine ou par la méthode de Feulgen et Rossenbeck.
Pour l'analyse en microscopie électronique, des échantillons de deux à trois
millimètres de côté sont prélevées sur des tissus de naissains fixés au liquide de Carson. Ces
pièces sont ensuite fixées à nouveau par la glutaraldéhyde 3%, post fixées à l'acide osmique
1 %, déshydratées, imprégnées et inclues en résine Epon. Des coupes semi-fines et ultrafines
sont réalisées comme décrit précédemment.
L'ensemble de ces protocoles est détaillé en Annexe 2.
Les lésions histologiques observées dans les tissus des naissains de C. gigas sont
essentiellement nucléaires. Les noyaux anormaux observés sont de deux types. Les uns sont
hypertrophiés et de forme anormale, leur chromatine est condensée en périphérie et apparaît
sous forme de mottes ou de croissants hyperbasophiles. La présence d'autres noyaux
atypiques, très condensés, est également fréquente (Figure 10). Ces lésions peuvent être
observées principalement dans les cellules du tissu conjonctif, et plus rarement du tissu
épithélial de différents organes qui sont, selon les individus, les branchies, le manteau, la
glande digestive ou les palpes labiaux.
Outre les lésions nucléaires, une désorganisation généralisée des tissus affectés peut
être observée. Les réactions inflammatoires autour des cellules infectées sont cependant
réduites.
En microscopie électronique à transmission, les cellules présentant des noyaux
anormaux peuvent être associées à la présence de particules virales. Toutefois, si ces
particules sont fréquemment observées dans les cellules présentant un noyaux hypertrophié,
elles ne sont associées que très rarement aux cellules présentant un noyau condensé
(Publication 3 : Figure 1).
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