Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

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CHAPITRE 1 Caractérisation d'un virus apparenté aux lymphocysfis chez la dorade royale, Sparus aurafa
Chapitre 1 : Caractérisation d'un virus apparenté aux Lymphocystis chez la dorade royale, Sparus aurata Publication 2 : Lympllocystis outbreaks in farmed sea bream, Spartls aurata, tirst report on French Mediterranean coasts. Bulletin of the European Association of Fish Pathologists Des échantillons de dorades royales, Sparus aurata, présentant les symptômes caractéristiques de l'infection par un virus de type Lymphocystis, ont pu être régulièrement obtenus auprès de plusieurs éleveurs français. La description des lésions histologiques associées à cette pathologie a été réalisée. L'observation de ces échantillons en microscopie électronique, a par la suite permis de confirmer l'identification de l'agent responsable de cette maladie. La caractérisation électrophorétique de cet agent a été réalisée à partir de particules virales purifiées. Enfin, grâce aux anticorps monoclonaux et polyclonaux disponibles au laboratoire, une caractérisation antigénique du virus, sur tissus fixés, a été réalisée. 1 - Caractérisation de l'infection par le Lymphocystis Disease Virus sur tissus fixés La description des lésions observées lors d'une infection à Lymphocystivirus est la première étape de ce travail. En effet, ces résultats permettront de comparer ultérieurement la détection des effets cytopathogènes, visualisés en histologie classique, avec la détection antigénique sur coupes. Selon les résultats, l'application de cette dernière méthode, pour le diagnostic de cette virose, pourra être envisagée. Des dorades royales, Sparus aurata, présentant une infection aiguë ont été obtenues auprès de différents éleveurs français, sur les côtes méditerranéenne et atlantique. Plusieurs niveaux lésionnels ont été observés sur ces poissons : les lésions macroscopiques sont les kystes qui constituent un stade avancé de l'infection (Publication 2 : Figure 1). Des lésions, signes d'une infection plus récente, peuvent être observées en histologie. Ces altérations, localisées au niveau de cellules de la peau, sont caractérisées par des noyaux à chromatine rejetée en périphérie, ainsi que par des inclusions basophiles dans le cytoplasme des fibroblastes du derme (Publication 2 : Figure 2a). L'observation des différents organes révèle, au niveau des reins, des anomalies de même type (noyaux anormaux et inclusions cytoplasmiques). Ces altérations sont observées dans les fibroblastes du tissu interstitiel, alors que les cellules des tubules rénaux ne présentent que des altérations nucléaires. La coloration de Feulgen et Rossenbeck (Annexe 2) a été utilisée pour montrer la nature des inclusions cytoplasmiques. La coloration rouge à rose de ces inclusions confirme qu'il s'agit d'ADN (Publication 2 : Figure 3), elles résultent de l'accumulation de virus dans le cytoplasme. L'absence d'inclusions basophiles dans le cytoplasme des cellules rénales semble indiquer que les anomalies nucléaires observées dans ce cas, résultent d'une souffrance des cellules et du mauvais état général des poissons plutôt que d'une infection de ces cellules par le LDV. En effet, ces dorades présentaient un stade avancé d'infection et les nombreuses lésions externes (Publication 2 : Figure 1) pourraient avoir perturbé l'osmorégulation des poissons, ce qui se traduirait par des lésions au niveau des cellules rénales. Par ailleurs, il a été montré que les protéines d'un autre virus apparenté aux Iridoviridae, le Chilo Iridescent Virus 39
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