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Contribution à l'étude de virus de mollusques marins apparentés ...

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De plus, la biologie d'o. edulis nécessite d'inoculer les larves <strong>de</strong> sept jours après la<br />

fécondation (Barnabé, 1986). Ces <strong>de</strong>rnières peuvent alors être dans un sta<strong>de</strong> <strong>de</strong><br />

développement pour lequel elles sont moins sensibles <strong>à</strong> l'infection virale.<br />

2.2 - Infection <strong>de</strong> larves axéniques <strong>de</strong> Crassostrea gigas par <strong>de</strong>s larves d'Ostrea edlllis<br />

vi rosées<br />

Des élevages <strong>de</strong> larves axéniques <strong>de</strong> C. gigas, âgées <strong>de</strong> trois jours, ont reçu<br />

respecti vement :<br />

- Des larves d' 0. edulis virosées, mourantes.<br />

- Des broyats clarifiés <strong>de</strong> larves d'o. edulis vi rosées, fraîches.<br />

- Des broyats clarifiés et ultrafiltrés <strong>de</strong> larves d'o. edulis virosées, fraîches.<br />

24 heures après l'inoculation, une réduction importante <strong>de</strong> l'activité <strong>de</strong> nage est<br />

observée pour environ 50% <strong>de</strong>s individus dans les élevages ayant été inoculés par les<br />

différents échantillons virosés. Dans ces mêmes élevages, 100% <strong>de</strong>s individus sont au fond<br />

<strong>de</strong>s récipients et présentent <strong>de</strong>s lésions au niveau <strong>de</strong> leur vélum, 48 heures après l'inoculation.<br />

Aucune mortalité n'est observée dans les élevages témoins, non inoculés.<br />

L'observation <strong>de</strong> ces échantillons en microscopie électronique 48 heures après<br />

l'inoculation <strong>de</strong>s échantillons virosés, révèle la présence <strong>de</strong> particules virales <strong>de</strong> types herpès<br />

dans les cellules <strong>de</strong>s larves <strong>de</strong> C. gigas inoculées. La présence <strong>de</strong> particules virales n'est pas<br />

détectée dans les larves témoins. Ces observations confirment l 'hypothèse <strong>de</strong> la transmission<br />

du <strong>virus</strong> <strong>de</strong> type herpès <strong>de</strong>s larves d' 0. edulis aux larves <strong>de</strong> C. gigas.<br />

Lors <strong>de</strong> phénomènes <strong>de</strong> mortalités larvaires chez ces espèces, les <strong>virus</strong> observés sont<br />

similaires du point <strong>de</strong> vue <strong>de</strong> leur morphologie et <strong>de</strong> leur taille (Nicolas et al., 1992, Hine et<br />

al., 1992; Renault et al., 1994a). Ces observations, associées aux résultats d'infection croisée,<br />

ne permettent cependant pas <strong>de</strong> conclure quant au nombre <strong>de</strong> <strong>virus</strong> différents pouvant être mis<br />

en cause dans les phénomènes <strong>de</strong> mortalité chez les larves d'huîtres.<br />

3 - Essais d'infection expérimentale <strong>de</strong> larves, naissains et adultes <strong>de</strong><br />

Crassostrea gigas en conditions non axéniques<br />

Dans l'objectif <strong>de</strong> pouvoir produire <strong>de</strong>s quantités suffisantes <strong>de</strong> tissus virosés,<br />

nécessaires en particulier <strong>à</strong> la purification <strong>de</strong>s particules virales, <strong>de</strong>s essais <strong>de</strong> contamination<br />

d'élevages larvaires en grand volume ainsi que <strong>de</strong> naissains et d'adultes <strong>de</strong> C. gigas ont été<br />

réalisés.<br />

Ces essais ont nécessité l'installation préalable d'une salle <strong>de</strong> pathologie située <strong>à</strong> l'écart<br />

<strong>de</strong>s salles d'écloserie et dont les rejets d'eau <strong>de</strong> mer sont recueillis dans <strong>de</strong>s cuves pour une<br />

décontamination ultérieure.<br />

3.1- Larves<br />

Les élevages larvaires ont été réalisés dans <strong>de</strong>s jarres <strong>de</strong> 120 litres. L'eau <strong>de</strong> mer<br />

préalablement filtrée sur cinq Ilm est décontaminée par addition d'eau <strong>de</strong> Javel (50 0 chlore;<br />

0,2 ml/l). Après contact pendant une nuit, l'eau <strong>de</strong> Javel est neutralisée par addition <strong>de</strong><br />

thiosulfate <strong>de</strong> sodium (200 gll ; 0,4 ml/l). La neutralisation <strong>de</strong> l'eau <strong>de</strong> Javel est contrôlée par<br />

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