легкая с обл

More documents

Recommendations

Info

‘5 (97) сентябрь 2016 г. ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА 31 вой инфекции связывают с оказанием медицинской помощи, чему способствует внедрение в повседневную клиническую практику новых высокотехнологических методов лечения, которые требуют увеличения объема инвазивных вмешательств, например, установки имплантатов, внутрисосудистых катетеров, электрокардиостимуляторов, электродов и т.д. [3, 4]. Особое место занимают грибы Candida albicans (C. albicans), на долю которого приходится ведущее место среди возбудителей поверхностных и глубоких хронических форм заболеваний. Особенностью кандидозов является полиморфизм их клинических признаков, а также множество мест локализации грибов C. albicans в одном макроорганизме. Так, у многих больных обратившихся в лабораторию микологии Казанского НИИ эпидемиологии и микробиологии, грибы высевали со слизистых оболочек, кожи, ногтевых валиков, мочи, кала. Связано это, по-видимому, с особенностями самого гриба. Грибы C. аlbicans обладают широким спектром патогенных свойств. Основными факторами вирулентности, определяющими патогенность гриба, являются: протеолитическая активность, модуляция иммунного ответа, способность клеток гриба к адгезии и диморфизму, фенотипическая изменчивость, способность к биопленкообразованию [5]. Кроме того, грибы C. albicans у человека редко выделяются в монокультуре. Как правило, они являются составляющими микробных ассоциаций. Заселяя кожу и слизистые, грибы и бактерии могут выступать в качестве возбудителей оппортунистических инфекций или провоцировать воспалительные реакции. Известно, что в микробной ассоциации между разными видами складываются сложные и неоднозначные взаимоотношения, в которых тесно переплетаются взаимные влияния участников ассоциаций друг на друга и на макроорганизм. Считается, что эти влияния могут осуществляться в следующих основных направлениях: 1) ассоцианты могут изменять биологические свойства, стимулировать или тормозить размножение и развитие основного возбудителя; 2) в условиях новых взаимоотношений между микробами может изменяться их воздействие на макроорганизм, как за счет усиления вирулентности возбудителя, так и за счет образования новых факторов, отягощающих течение болезни; 3) дополнительная сенсибилизация человека микробами, входящими в ассоциацию [6]. В этиологии инфекции, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП), большое значение имеют микробные ассоциации. В связи с этим, важным дополнением к установлению возможных осложнений протекания инфекционных заболеваний является исследование изменения вирулентной активности in vitro у различных клинических штаммов C. albicans, выделенных из различных анатомических локусов человека, под действием экстракта Staphylococcus aureus, как наиболее часто встречаемого в микробиологических посевах у больных. Материал и методы Объектом исследования служили дрожжевые грибы C. albicans (6 штаммов), выделенные от пациентов, находящихся на амбулаторном лечении с клиническими признаками поверхностной кандидозной инфекции различной локализации (слизистых, кожных покровов и ногтевых пластин), при обследовании в клинико-диагнастическом центре Казанского НИИ эпидемиологии и микробиологии. Микроорганизмы выделялись стандартными методами с использованием агара Сабуро. Определение адгезивных свойств выделенных штаммов C. albicans проводилось на ранее разработанной авторами модели адгезии клеток гриба на нитроцеллюлозную пленку с иммобилизированным гемоглобином [7]. Полученную пленку площадью 7 см 2 инкубировали при температуре 30 0 С с 3 мл суспензии клеток гриба в 0,1М фосфатном буфере в течение двух часов. Начальная оптическая плотность суспензии клеток составляла 0,18-0,21 при длине волны 540 нм. Определение уровня адгезии проводили по разнице начальной и конечной оптической плотности суспензии клеток, а также прямым подсчетом клеток в суспензии с помощью микроскопа Микмед – 6, при увеличении 10х20, подсчитывали не менее 10 полей зрения. Для изучения влияния бактерий-ассоциантов на адгезивные свойства штаммов C. albicans в работе использовали бактериальный экстракт Staphylococcus aureus, предоставленный и изготовленный лабораторией по разработке бактериальных аллергенов Казанского НИИ эпидемиологии и микробиологии в соответствии стандартам ВФС 42-93-88. Ингибирующее или стимулирующее действие бактериального экстракта на адгезивную способность клеток проводили методом острого опыта двумя способами [8]. 1 вариант: Культуру клеток C. albicans раннего возраста засевали в жидкую питательную среду Сабуро, разлитую в пробирки по 3 мл с разной концентрацией (0,05; 0,1; 0,2; 0,4 мл) соответствующего экстракта и в течение 48 часов культивировали при температуре 30 0 С. Затем определяли уровень адгезии как описано выше. В качестве контроля исследовали культуру клеток C. albicans, выросшую без добавления экстрактов. 2 вариант: Бактериальный экстракт разной концентрации (0,05; 0,1; 0,2; 0,4 мл) добавляли непосредственно в инкубационную среду в пробирки с суспензией клеток и нитроцеллюлозной пленкой. Затем определяли уровень адгезии как описано выше. Все результаты усредняли по трем измерениям и оценивали достоверность различий по критерию Стъюдента. Результаты и обсуждения Все группы штаммов грибов C. albicans были разделены с учетом места обнаружения: три штамма из зева и ротовой полости и три штамма, выделенные с поверхности гладкой кожи туловища и конечностей. Способность C. albicans к адгезии ― это не только один из основных вирулентных факторов, определяющих патогенность гриба, являющийся первоначальным этапом развития инфекции, но и начальная стадия в цикле формирования биопленки. В связи с этим, первым этапом иследования стало изучение адгезивной активности штаммов. В ходе исследования выявлено, что наибольший процент адгезии отмечался у штаммов, выделенных с поверхностей слизистых оболочек ротовой полости в обеих группах, в то время как штаммы, выделенные с кожи и ее придатков, существенно (в 1,5-3 раза) уступали им в адгезии. Уровень адгезии изолятов C. albicans, обнаруженных на слизистых оболочках зева и ротовой полости, достигал 46%, тогда как штаммы, обнаруженные у больных с диагнозами кандидоз кожи, имели уровень адгезии от 8 до 20% (рис. 1). хирургия
32 ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА ‘5 (97) сентябрь 2016 г. Рисунок 1. Уровень адгезии клинических штаммов С. albicans при кандидозах различной локализации Рисунок 2. Адгезивные свойства штаммов C. albicans, при совместном культивировании с экстрактом St. аureus хирургия Низкий уровень адгезивных свойств штаммов, выделенных с кожи и придатков, вероятно связан с резко отличающимися условиями жизни гриба: низкая влажность, малодоступные субстраты (кератин, коллаген). Вероятно, здесь главную роль играют другие факторы патогенности, например комплекс внеклеточных протеолитических ферментов, в первую очередь секретируемых аспарагировых протеиназ, обладающих способностью разрушать белки кожных покровов [5]. С другой стороны, штаммы, обнаруженные в ротовой полости, постоянно обеспечиваются питательными веществами, но для закрепления в среде, где идет постоянное вымывание, высокая адгезия может служить необходимым фактором. Совместный рост грибов C. albicans и различных видов бактерий в культурах из патологического материала на среде Сабуро и МПА показывает разнообразные взаимоотношения данных видов. Нередко можно видеть зону «неприкосновенности» вокруг некоторых колоний бактерий, например Pseudomonas aeruginosa, в которые не вступает дольше растущие грибы. По-видимому, диффундирующие в среду продукты жизнедеятельности бактерий задерживают развитие грибов. И совсем другая картина наблюдается у колоний C. albicans и Staph. aureus, которые почти всегда прекрасно чувствуют себя друг с другом. Можно предположить, что данный вид бактерий оказывает благоприятное воздействие на культуру C. albicans, способствуя их развитию. Исходя из этого, для исследования ингибирующего или стимулирующего влияния Staph. aureus на адгезивные свойства штаммов C. albicans был взят бактериальный экстракт данного вида в
Page 1 and 2: Íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêè
Page 3 and 4: 2 ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИ
Page 11 and 12: 10 ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕД
Page 31: 30 ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕД
Page 83 and 84:
82 ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕД
Page 85 and 86:
Page 87 and 88:
Page 89 and 90:
Page 91 and 92:
Page 93 and 94:
Page 95 and 96:
Page 97 and 98:
Page 99 and 100:
Page 101 and 102:
Page 103 and 104:
Page 105 and 106:
Page 107 and 108:
Page 109 and 110:
Page 111 and 112:
Page 113 and 114:
Page 115 and 116:
Page 117 and 118:
Page 119 and 120:
Page 121 and 122:
Page 123 and 124:
Page 125 and 126:
Page 127 and 128:
Page 129 and 130:
Page 131 and 132:
Page 133 and 134:
Page 135 and 136:
Page 137 and 138:
Page 139 and 140:
Page 141 and 142:
Page 143 and 144:
Page 145 and 146:
Page 147 and 148:
Page 149 and 150:
Page 151 and 152:
Page 153:
реклама реклама
show all

легкая с обл

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?