2011 年底结题项目汇编 - 国家自然科学基金委员会医学科学部

医 学 科 学 部 六 处 地 区 科 学 基 金 项 目 H2604 食 品 262H2604 食 品 卫 生基 于 赭 曲 霉 毒 素 A 的 高 密 度 分 子 模 拟 表 位 的 构 建 及 其 应 用 研 究批 准 号 :30860240项 目 负 责 人 : 刘 仁 荣所 在 单 位 : 江 西 科 技 师 范 学 院竞 争 免 疫 分 析 方 法 在 赭 曲 霉 毒 素 A、 黄 曲 霉 毒 素 B1 等 真 菌 毒 素 的 快 速 检 测 中 发 挥 着 重 要 的 作 用 ,但 该 类 方 法 须 使 用 真 菌 毒 素 与 载 体 偶 联 制 备 竞 争 抗 原 , 给 试 剂 的 生 产 和 使 用 者 带 来 毒 性 危 害 。 研 制这 些 毒 素 的 模 拟 表 位 、 以 之 建 立 无 毒 害 的 免 疫 学 检 测 方 法 具 有 较 大 的 科 学 价 值 和 应 用 前 景 。 本 研 究通 过 噬 菌 体 随 机 肽 库 技 术 , 以 赭 曲 霉 毒 素 A 单 克 隆 抗 体 为 靶 标 , 成 功 筛 选 到 11 种 模 拟 表 位 ; 但 这 些模 拟 表 位 都 是 表 达 在 次 要 衣 壳 蛋 白 上 , 拷 贝 数 量 太 少 , 无 法 将 其 直 接 应 用 于 竞 争 抗 原 的 制 备 。 本 研究 通 过 分 子 生 物 学 方 法 , 应 用 PC89 噬 菌 粒 载 体 , 将 赭 曲 霉 毒 素 A 的 模 拟 表 位 导 入 至 M13 噬 菌 体 的 主要 衣 壳 蛋 白 pⅧ 上 , 并 引 入 了 肠 激 酶 切 割 位 点 , 通 过 单 克 隆 抗 体 结 合 及 DNA 测 序 验 证 , 获 得 了 在 N 末端 高 密 度 表 达 模 拟 表 位 的 重 组 噬 菌 体 ; 再 以 其 为 竞 争 抗 原 , 建 立 了 新 的 竞 争 酶 联 免 疫 吸 附 检 测(ELISA) 方 法 , 并 对 该 方 法 的 各 项 技 术 指 标 进 行 综 合 测 试 和 对 比 实 验 ; 研 究 证 明 该 方 法 在 检 测 的灵 敏 度 、 准 确 度 和 精 确 度 等 方 面 与 传 统 ELISA 方 法 一 致 , 并 已 经 成 功 将 该 方 法 应 用 于 建 立 黄 曲 霉 毒素 B1 的 竞 争 ELISA 检 测 方 法 , 本 研 究 为 类 似 的 有 毒 物 质 的 免 疫 学 检 测 方 法 探 索 了 一 条 高 效 、 低 成 本 、无 毒 害 的 制 备 竞 争 抗 原 的 新 方 法 。关 键 词 : 噬 菌 体 肽 库 ; 酶 联 免 疫 分 析 ; 赭 曲 霉 毒 素 A; 模 拟 表 位 ; 噬 菌 粒学 科 代 码 :H2604获 奖 : 国 家 级 0 省 部 级 0 国 际 学 术 奖 0发 表 论 文 : 国 际 刊 物 0 国 内 核 心 刊 物 5 国 内 一 般 刊 物 0 SCI 收 录 0[1] * 刘 仁 荣 , 徐 玲 , 裘 雪 梅 , 陈 兴 龙 , 朱 立 鑫 . 基 于 赭 曲 霉 毒 素 A 模 拟 表 位 的 无 毒 素 ELISA 方 法 . 食品 与 机 械 , 06 期 , pp 47-50, 2010/11/11( 中 国 知 网 ).[2] 徐 玲 , 裘 雪 梅 , * 刘 仁 荣 . 赭 曲 霉 毒 素 A 模 拟 表 位 pⅧ 噬 菌 体 表 达 载 体 的 构 建 . 食 品 科 学 , 31(17), pp307-309, 2010/9/9( 中 国 知 网 ).[3] 陈 兴 龙 , 徐 玲 , * 刘 仁 荣 , 裘 雪 梅 . 基 于 噬 菌 体 展 示 技 术 的 赭 曲 霉 毒 素 A 高 密 度 模 拟 表 位 的 表 达 研究 . 食 品 科 学 .( 已 录 用 )[4] 胡 娜 , 刘 仁 荣 , 常 军 , 白 腾 龙 . 赭 曲 霉 毒 素 A 化 学 发 光 免 疫 分 析 技 术 的 建 立 . 食 品 科 技 , 35(07), pp300-302, 2010/7/7( 中 国 知 网 ).[5] 徐 玲 , * 刘 仁 荣 , 裘 雪 梅 . 黄 曲 霉 毒 素 B1 抗 原 模 拟 表 位 的 高 效 表 达 . 中 国 公 共 卫 生 研 究 . ( 已 录用 )会 议 报 告 : 国 际 特 邀 0 分 组 2 国 内 特 邀 0 分 组 0 EI 收 录 2 ISTP 收 录 2专 利 : 国 外 0 国 内 2( 申 请 )培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 0 硕 士 3( 在 读 1 毕 业 2) 中 青 年 学 术 带 头 人 0学 术 交 流 : 举 办 国 际 会 议 0 次 参 加 2 人 举 办 国 内 会 议 0 出 国 参 加 国 际 会 议 0学 科 审 核 意 见 :1 篇 国 内 期 刊 论 文 未 标 注 本 资 助 批 准 号 ,2 名 硕 士 生 毕 业 未 提 供 证 明 材 料NSFC 医 学 科 学 部 六 处 预 防 医 学 学 科2011 年 底 结 题 项 目 汇 编